發(fā)布時間：2017-09-22 02:17

  本文關(guān)鍵詞：水牛bbu-miR-103-1在泌乳期與非泌乳期表達模式及靶向基因的初步研究

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【摘要】：旨在探討bbu-miR-103-1在水牛泌乳期和非泌乳期的差異表達模式,并預(yù)測其靶向調(diào)控基因及功能。本研究應(yīng)用qRT-PCR檢測bbu-miR-103-1,在水牛泌乳期和非泌乳期的差異表達。構(gòu)建bbu-miR-103-1前體表達質(zhì)粒LpEZX-pre-miR-103-1,并在293T細胞中包裝高滴度的慢病毒顆粒,用于感染水牛乳腺上皮細胞實現(xiàn)過表達bbu-miR-103-1,同時應(yīng)用化學合成的bbu-miR-103-1抑制劑轉(zhuǎn)染水牛上皮細胞實現(xiàn)抑制表達bbu-miR-103-1,研究bbu-miR-103-1對PANK3及乳脂代謝相關(guān)基因表達的影響。結(jié)果表明,水牛泌乳期bbu-miR-103-1的相對表達量為非泌乳期的5.29倍(P0.01);成功構(gòu)建的慢病毒載體LpEZX-pre-miR-103-1包裝獲得了感染滴度為3.47×106PFU·mL-1的慢病毒顆粒;過表達和抑制表達bbu-miR-103-1分別極顯著下調(diào)和上調(diào)了水牛乳腺上皮細胞PANK3基因的相對表達量(P0.01);過表達bbu-miR-103-1極顯著提高了ACACA、GPAM、DGAT1和PDK4基因的表達(P0.01),對SREBP1c、ADFP、CD36、ACSS1等基因產(chǎn)生了顯著的上調(diào)作用(P0.05)。過表達bbu-miR-103-1通過下調(diào)PANK3的表達,反饋提高了SREBP1c的mRNA水平,促進了以ACACA開頭的脂肪酸從頭合成。表明bbu-miR-103-1對水牛乳脂肪合成有十分重要的促進作用,為揭示水牛高乳脂形成和調(diào)控機理提供了分子依據(jù)。
【作者單位】： 廣西大學亞熱帶農(nóng)業(yè)生物資源保護與利用國家重點實驗室;廣西壯族自治區(qū)畜牧研究所;
【關(guān)鍵詞】： 水牛 bbu-miR-- 表達模式 PANK
【基金】：國家自然科學基金(31260552) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)(2011AA100607) 優(yōu)勢生態(tài)牧草品種遴選及果草耦合系統(tǒng)碳氮源匯的研究與示范(桂科合14125008-2-13) 國審牧草新品種紫色象草的繁育與推廣(桂漁牧科201453057)
【分類號】：S823.83
【正文快照】： 小的非編碼RNA分子miRNA,大小為18~25nt個核苷酸,由生物體自身的基因轉(zhuǎn)錄而成,在轉(zhuǎn)錄后和轉(zhuǎn)錄前水平上參與基因表達的調(diào)控[1-3]。據(jù)估算,miRNA可能對所有哺乳動物的2%~5%的基因負責,調(diào)節(jié)多達60%的蛋白編碼基因[4]。miR-NA通過與靶mRNA的堿基互補配對,使靶mRNA降解或者沉默從而

【參考文獻】

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本文編號：898216