利用免疫沉淀法對(duì)雞源志賀菌IpaC蛋白受體候選蛋白的初步篩選
發(fā)布時(shí)間:2017-09-19 00:05
本文關(guān)鍵詞:利用免疫沉淀法對(duì)雞源志賀菌IpaC蛋白受體候選蛋白的初步篩選
更多相關(guān)文章: 雞源志賀菌 IpaC蛋白 雞腸上皮細(xì)胞 免疫沉淀 LC-MS/MS 受體
【摘要】:為篩選雞源志賀菌IpaC蛋白的受體。利用生物素標(biāo)記試劑盒標(biāo)記IpaC蛋白,分離培養(yǎng)原代雞腸上皮細(xì)胞和。利用ProteoExtract?天然膜蛋白提取試劑盒提取雞腸上皮細(xì)胞的膜蛋白;應(yīng)用免疫沉淀、免疫磁珠法分離富集與IpaC蛋白結(jié)合的蛋白質(zhì);利用SDS-PAGE電泳檢測(cè)和Western blot鑒定。結(jié)果獲得了與IpaC蛋白特異性結(jié)合的大約在34 000~55 000之間的蛋白條帶。篩選得到的SDS-PAGE蛋白條帶進(jìn)行LC-MS/MS測(cè)序鑒定和生物信息學(xué)分析。初步將annexin A2,37 000Laminin receptor precursor,LIM and SH3protein 1,ras-related protein Rab-43作為IpaC蛋白受體的候選蛋白。為研究志賀菌在雞體內(nèi)的致病機(jī)制奠定基礎(chǔ),而且可以為評(píng)估雞源志賀菌在公共衛(wèi)生方面的重要性提供參考依據(jù)。
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 雞源志賀菌 IpaC蛋白 雞腸上皮細(xì)胞 免疫沉淀 LC-MS/MS 受體
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31272568)
【分類號(hào)】:S852.61
【正文快照】: *Corresponding author,E-mail:xulanju11@126.com志賀菌是一種能引起細(xì)菌性痢疾的胞內(nèi)致病菌[1],2004年許蘭菊等[2]發(fā)現(xiàn)了首例感染雞的病例,主要感染雛雞,病死率為3.84%~33.3%。該菌可引起雛雞腹瀉,重者導(dǎo)致黏液性膿血痢甚至死亡,耐過(guò)雞表現(xiàn)生長(zhǎng)發(fā)育遲緩[3]。相關(guān)的研究表明,
本文編號(hào):878312
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