本文關(guān)鍵詞：羊口瘡病毒陜西分離株B2L基因的克隆、序列分析及原核表達(dá)

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【摘要】：為了對(duì)羊口瘡病毒(ORFV)陜西分離株B2L基因進(jìn)行克隆、序列分析及原核表達(dá),根據(jù)GenBank已登錄的ORFV(JN565694.1)B2L基因序列,設(shè)計(jì)合成一對(duì)特異性引物,應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增ORFV B2L基因,并將目的基因連接到原核表達(dá)載體pET-28a中,成功構(gòu)建重組質(zhì)粒PET28a-B2L,轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),并進(jìn)行SDS-PAGE和Western blot分析。結(jié)果表明,成功克隆了ORFV陜西分離株B2L全基因序列,核苷酸序列分析表明,陜西分離株B2L基因與國(guó)內(nèi)外已報(bào)道的ORFV毒株核苷酸同源性超過97.3%,氨基酸同源性超過95.0%。重組菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后成功表達(dá)分子質(zhì)量約為42ku的重組蛋白,該蛋白能與羊口瘡陽(yáng)性血清特異性結(jié)合,具有良好的反應(yīng)原性。研究結(jié)果為ORFV的分子生物學(xué)特性研究提供資料,為進(jìn)一步研制ORFV單克隆抗體及抗體檢測(cè)ELISA試劑盒奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 羊口瘡病毒 BL基因 克隆 序列分析 原核表達(dá)
【基金】：陜西省重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新鏈項(xiàng)目(2016KTZDNY02-06) 陜西省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新與攻關(guān)項(xiàng)目(2016NY-092) 西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗(yàn)示范站(基地)科技成果推廣項(xiàng)目(TGZX2015-32)
【分類號(hào)】：S852.654
【正文快照】： 羊口瘡(Orf)又稱羊接觸傳染性膿皰皮炎(Con-tagious pustular dermatitis),是由羊口瘡病毒(Orfvirus,ORFV)引起的一種急性接觸性人獸共患傳染病,我國(guó)將其列為三類動(dòng)物疫病[1-2]。羊口瘡病毒屬于痘病毒科副痘病毒屬,病毒粒子大小約為280nm×170nm,一般呈橢圓形,也有球形、錐形

【相似文獻(xiàn)】

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