本文關(guān)鍵詞：麒麟雞、懷鄉(xiāng)雞肉品質(zhì)性狀及GPAT基因多態(tài)性研究

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【摘要】：本試驗(yàn)以麒麟雞和懷鄉(xiāng)雞2個(gè)品種為試驗(yàn)素材,對(duì)12、14、16周齡的肌肉、脂肪組織學(xué)和肌肉肌苷酸含量進(jìn)行測(cè)定;利用PCR-SSCP技術(shù)對(duì)肌苷酸合成代謝中的關(guān)鍵酶基因GPAT的SNPs位點(diǎn)進(jìn)行篩查;采用RT-PCR技術(shù)分析GPAT基因在肉雞不同組織不同時(shí)間的表達(dá)規(guī)律。旨在通過(guò)群體水平、個(gè)體水平和基因水平三個(gè)方面對(duì)雞肉肌苷酸含量遺傳規(guī)律進(jìn)行探討,為肉雞高肌苷酸含量的標(biāo)記輔助選擇提供科學(xué)參考。本研究結(jié)果表明:(1)肌肉脂肪組織學(xué):12周齡麒麟公雞脂肪體積顯著高于懷鄉(xiāng)公雞(P0.05),14周齡時(shí)懷鄉(xiāng)母雞脂肪體積極顯著高于麒麟母雞(P0.01);麒麟雞胸肌纖維根數(shù)顯著高于懷鄉(xiāng)雞(P0.05),懷鄉(xiāng)雞胸肌纖維直徑、腿肌纖維根數(shù)極顯著或顯著高于麒麟雞(P0.05/P0.01)。(2)肌肉肌苷酸含量:12、16周齡懷鄉(xiāng)雞胸肌中肌苷酸含量都顯著高于14周齡(P0.05),16周齡懷鄉(xiāng)雞腿肌中肌苷酸含量分別顯著高于12周齡(P0.05)和14周齡(P0.05);16周齡麒麟雞胸肌中肌苷酸含量分別顯著高于12周齡(P0.05)和14周齡(P0.05),14周齡麒麟雞腿肌中肌苷酸含量顯著和極顯著高于12周齡(P0.05)和16周齡(P0.01)。(3)單核苷酸多態(tài)性:麒麟雞、懷鄉(xiāng)雞和貴妃雞三個(gè)雞種GPAT基因上第34787bp處發(fā)現(xiàn)了1個(gè)SNP位點(diǎn)(G34993A),該位點(diǎn)堿基的突變導(dǎo)致了原編碼谷氨酰胺(Gln)突變?yōu)榻K止密碼子,該突變?yōu)闊o(wú)義突變。三個(gè)雞種G34993A位點(diǎn)均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài),麒麟雞、懷鄉(xiāng)雞和貴妃雞的PIC值分別為0.253、0.303和0.297,三個(gè)群體的PIC都處于中度多態(tài),群體遺傳結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。這說(shuō)明了三個(gè)雞種都有豐富的遺傳信息,具有一定的遺傳多樣性和育種潛力。(4)GPAT基因表達(dá):GPAT基因在麒麟雞各組織表達(dá)量隨日齡增加均呈下降趨勢(shì),而懷鄉(xiāng)雞各組織表達(dá)量則隨日齡增加呈先升后降的變化,這表明兩個(gè)品種對(duì)體內(nèi)肌苷酸合成的調(diào)控機(jī)制存在差異;麒麟雞和懷鄉(xiāng)雞GPAT基因三個(gè)時(shí)間點(diǎn)中肝臟的表達(dá)量最高;麒麟雞和懷鄉(xiāng)雞肝臟的GPAT表達(dá)量與腿肌肌苷酸含量呈負(fù)相關(guān)。這可能與品種間差異有關(guān),麒麟雞全身羽毛翻卷,具有良好的抗熱性,能減少高溫應(yīng)激對(duì)肝臟的損傷。
【關(guān)鍵詞】：麒麟雞 懷鄉(xiāng)雞 肉品質(zhì) 肌苷酸候選基因 單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)
【學(xué)位授予單位】：廣東海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S831
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 英文縮寫詞表10-11
• 1 文獻(xiàn)綜述11-18
• 1.1 肉品質(zhì)性狀研究進(jìn)展11-13
• 1.1.1 肉品質(zhì)性狀的定義11-12
• 1.1.2 雞肉品質(zhì)性狀的因素12-13
• 1.2 肌苷酸的研究進(jìn)展13-15
• 1.2.1 肌苷酸的特性概述13
• 1.2.2 肌苷酸的合成代謝13-14
• 1.2.3 影響畜禽肌苷酸含量的因素14-15
• 1.3 肌苷酸相關(guān)候選GPAT基因的研究進(jìn)展15-16
• 1.3.1 GPAT基因結(jié)構(gòu)概述15-16
• 1.3.2 畜禽GPAT基因的相關(guān)研究16
• 1.4 研究目的與意義16-18
• 2 麒麟雞、懷鄉(xiāng)雞脂肪與肌肉組織學(xué)特性觀察18-25
• 2.1 試驗(yàn)材料和方法18-19
• 2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物和飼養(yǎng)管理18
• 2.1.2 脂肪與肌肉組織學(xué)特性觀察內(nèi)容和方法18-19
• 2.1.3 統(tǒng)計(jì)方法19
• 2.2 結(jié)果與分析19-23
• 2.2.1 麒麟雞懷鄉(xiāng)雞脂肪組織學(xué)觀察與統(tǒng)計(jì)結(jié)果19-20
• 2.2.2 麒麟雞懷鄉(xiāng)雞肌肉組織學(xué)觀察與統(tǒng)計(jì)結(jié)果20-23
• 2.3 討論23-24
• 2.3.1 麒麟雞懷鄉(xiāng)雞脂肪組織學(xué)特性比較分析23-24
• 2.3.2 麒麟雞懷鄉(xiāng)雞肌肉組織學(xué)特性比較分析24
• 2.4 小結(jié)24-25
• 3 麒麟雞、懷鄉(xiāng)雞肌肉肌苷酸含量測(cè)定25-29
• 3.1 試驗(yàn)材料和方法25
• 3.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物和飼養(yǎng)管理25
• 3.1.2 肌肉肌苷酸含量測(cè)定內(nèi)容和方法25
• 3.1.3 統(tǒng)計(jì)方法25
• 3.2 結(jié)果與分析25-27
• 3.2.1 肌苷酸標(biāo)準(zhǔn)曲線和雞肉樣品液相色譜圖25-27
• 3.2.2 麒麟雞懷鄉(xiāng)雞肌苷酸含量的測(cè)定結(jié)果27
• 3.3 討論27-28
• 3.3.1 日齡對(duì)肌肉肌苷酸含量的影響27
• 3.3.2 品種對(duì)肌肉肌苷酸含量的影響27-28
• 3.4 小結(jié)28-29
• 4 GPAT基因的SNP位點(diǎn)多態(tài)性分析29-39
• 4.1 材料和方法29-33
• 4.1.1 試驗(yàn)材料29
• 4.1.2 主要儀器設(shè)備29
• 4.1.3 主要試驗(yàn)試劑及配制29-30
• 4.1.4 基因組DNA的抽提與檢測(cè)30
• 4.1.5 GPAT基因SNPs多態(tài)性位點(diǎn)的篩查30-32
• 4.1.6 多態(tài)片段測(cè)序32
• 4.1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析32-33
• 4.2 結(jié)果與分析33-37
• 4.2.1 GPAT基因SNPs多態(tài)性位點(diǎn)篩查結(jié)果33-34
• 4.2.2 PCR-SSCP檢測(cè)結(jié)果34-35
• 4.2.3 GPAT基因群體遺傳學(xué)統(tǒng)計(jì)分析35-36
• 4.2.4 GPAT基因SNP位點(diǎn)遺傳多態(tài)性分析36-37
• 4.3 討論37-38
• 4.3.1 GPAT基因SNPs位點(diǎn)分析37
• 4.3.2 SNP位點(diǎn)多態(tài)性分析37-38
• 4.4 小結(jié)38-39
• 5 GPAT基因在組織中時(shí)空表達(dá)規(guī)律研究39-47
• 5.1 材料與方法39-42
• 5.1.1 試驗(yàn)材料39
• 5.1.2 主要儀器設(shè)備39
• 5.1.3 主要試劑39-40
• 5.1.4 總RNA的提取與檢測(cè)40
• 5.1.5 總RNA反轉(zhuǎn)錄40
• 5.1.6 引物設(shè)計(jì)與合成40-41
• 5.1.7 PCR產(chǎn)物的檢測(cè)41
• 5.1.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR41-42
• 5.2 結(jié)果與分析42-45
• 5.2.1 組織總RNA電泳結(jié)果42
• 5.2.2 熒光定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)42-43
• 5.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR產(chǎn)物的特異性43
• 5.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量的擴(kuò)增效率43-44
• 5.2.5 麒麟雞、懷鄉(xiāng)雞各組織GPAT基因的表達(dá)量44-45
• 5.2.6 麒麟雞懷鄉(xiāng)雞GPAT基因表達(dá)水平與肌苷酸含量關(guān)聯(lián)分析45
• 5.3 討論45-46
• 5.3.1 RT-PCR的選擇45-46
• 5.3.2 GPAT基因時(shí)空表達(dá)規(guī)律研究46
• 5.3.3 GPAT基因表達(dá)水平與肌苷酸含量的相關(guān)性分析46
• 5.4 小結(jié)46-47
• 6 結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-55
• 致謝55-56
• 作者簡(jiǎn)介56-57
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介57

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：835554