本文關(guān)鍵詞：雞傳染性貧血病毒熒光定量PCR檢測方法的建立及其在疫苗污染檢測中的應(yīng)用

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【摘要】：為了更快速而靈敏地檢測禽弱毒疫苗中雞傳染性貧血病毒(CIAV)的污染,根據(jù)CIAV基因組保守序列設(shè)計合成了引物及TaqMan探針,通過優(yōu)化反應(yīng)條件建立了快速檢測CIAV的實時熒光定量PCR檢測方法。結(jié)果顯示,建立的檢測方法靈敏度可達(dá)10拷貝·μL~(-1),比常規(guī)PCR靈敏度高100倍。該方法與禽白血病病毒、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒以及馬立克病病毒等病毒基因均無交叉反應(yīng),具有很好的特異性;批內(nèi)重復(fù)和批間重復(fù)顯示變異系數(shù)均小于2%,呈現(xiàn)良好的可重復(fù)性。在模擬試驗中,該方法能夠檢測到1 000羽份弱毒疫苗中1個EID50的低劑量污染,應(yīng)用該方法從送檢的39種(批)商品化禽用弱毒疫苗中檢測到2份為CIAV陽性。上述結(jié)果表明,本研究建立的熒光定量PCR檢測方法靈敏度高,特異性強,重復(fù)性好,可用于檢測疫苗中CIAV低劑量的污染。
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 雞傳染性貧血病毒 實時熒光定量PCR 弱毒疫苗 污染
【基金】：農(nóng)業(yè)部財政項目“禽垂直傳播性疾病診斷技術(shù)研究”
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 雞傳染性貧血病毒(chicken infectious anemiavirus,CIAV)可引起雛雞骨髓造血組織和胸腺等淋巴組織的萎縮,并導(dǎo)致感染雞發(fā)生貧血和免疫抑制。自1979年日本學(xué)者首次報道CIAV以來[1],CIAV感染已在我國及其他國家普遍存在[2-6]。由于CIAV感染非常普遍并可以通過種蛋垂直傳播,在養(yǎng)

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3 薛飛;朱遠(yuǎn)茂;楊建德;王曉鈞;相文華;趙立平;呂曉玲;沈榮顯;;馬傳貧驢白細(xì)胞弱毒疫苗株酸性蛋白p9基因的克隆與表達(dá)[A];慶祝黑龍江省免疫學(xué)會成立十周年（1993—2003）論文集[C];2003年

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