本文關(guān)鍵詞：牛支原體武威株脂蛋白P48基因的克隆、原核表達(dá)及亞細(xì)胞定位

  更多相關(guān)文章： 牛支原體 P 基因克隆 原核表達(dá) 亞細(xì)胞定位

【摘要】：【目的】驗(yàn)證牛支原體P48蛋白在細(xì)胞中的位置,并為后續(xù)功能的研究奠定基礎(chǔ).【方法】運(yùn)用Overlap PCR擴(kuò)增獲得點(diǎn)突變后的牛支原體武威分離株P(guān)48基因,并將其克隆至pGEM-T Easy,將測序正確的質(zhì)�？寺≈帘磉_(dá)載體pET-28a中,構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒pET-P48,表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),并在IPTG誘導(dǎo)下成功獲得融合蛋白表達(dá)產(chǎn)物rMbP48,大小約為51ku.重組蛋白純化后免疫新西蘭大白兔制備多克隆抗體.在分離牛支原體膜蛋白的基礎(chǔ)上應(yīng)用Western-blot及間接ELISA對P48蛋白在細(xì)胞中的分布進(jìn)行分析.【結(jié)果】P48蛋白主要存在于牛支原體的膜分離相.全菌免疫熒光試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)脂蛋白P48位于牛支原體的膜表面.【結(jié)論】牛支原體P48蛋白是存在于牛支原體表面的一種具有免疫原性的脂蛋白.本研究為進(jìn)一步研究P48蛋白的生物學(xué)特性及建立高效的牛支原體診斷方法奠定了基礎(chǔ).
【作者單位】： 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 牛支原體 P 基因克隆 原核表達(dá) 亞細(xì)胞定位
【基金】：甘肅省自然科學(xué)基金項(xiàng)目“新生犢牛傳染性肺炎病原的分離、鑒定及快速診斷方法研究”(1308RTZA235)
【分類號】：S852.62
【正文快照】： 牛支原體(Mycoplasma bovis,Mb)是牛呼吸道疾病的重要病原體之一,于1961年被Hale等[1]從美國乳房炎病牛中首次分離,并于1976年證實(shí)其與牛呼吸系統(tǒng)疾病有關(guān).現(xiàn)已證實(shí),牛支原體不僅可引起牛的肺炎、耳炎、流產(chǎn)、關(guān)節(jié)炎、奶牛乳房炎和生殖道炎癥等疾病,而且可與多殺性巴氏桿菌、，

本文編號：795188