發(fā)布時間：2017-09-03 20:05

  本文關(guān)鍵詞：牦牛腸道病毒間接免疫熒光檢測方法的建立與初步應(yīng)用

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【摘要】：為了建立準(zhǔn)確、快速的牦牛腸道病毒(yak enterovirus)檢測方法,利用本實驗室已獲得的一株牦牛腸道病毒SWUN-AB001,免疫健康兔獲得抗SWUN-AB001高免血清,建立了一種檢測牦牛腸道病毒的間接免疫熒光試驗(IFA)方法,并對其工作條件和時間進(jìn)行篩選,優(yōu)化出最佳條件。采用該方法對40份臨床腹瀉樣本進(jìn)行了牦牛腸道病毒的檢測,并與RT-PCR的檢測結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果表明:獲得的高免血清在該IFA方法中的最佳稀釋度為1∶100,工作時間為30min;FITC標(biāo)記的羊抗兔IgG(二抗)的稀釋度為1∶800,工作時間為45min,牦牛腸道病毒特異性亮綠色熒光顆粒清晰可見;同時與牛病毒性腹瀉病毒、輪狀病毒、大腸桿菌、沙門菌、葡萄球菌和空腸彎曲桿菌反應(yīng)均未見明顯的熒光顆粒;該方法能夠檢測SWUN-AB001病毒的最低濃度約為20TCID50·mL-1;該方法的臨床檢測結(jié)果與RT-PCR的檢測結(jié)果之間無差異(P=0.329)。結(jié)果表明該方法特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、靈敏度高,為該病毒在牦牛養(yǎng)殖地區(qū)的流行病學(xué)調(diào)查、臨床診斷和快速診斷試劑的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;四川省畜牧科學(xué)研究院;國家民委青藏高原動物疫病防控創(chuàng)新團(tuán)隊;
【關(guān)鍵詞】： 牦牛 腸道病毒 間接免疫熒光檢測方法
【基金】：“十三五”國家重點研發(fā)計劃(2016YFD0500907) 四川省科技計劃項目青年基金(2014JQ0044) 四川省教育廳創(chuàng)新團(tuán)隊項目(13TD00527) 四川奶牛傳染系流產(chǎn)的病原調(diào)查研究(SASA2015A12) 西南民族大學(xué)中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項資金項目(2016NGJPY10)
【分類號】：S858.23
【正文快照】： 腸道病毒(enterovirus,EV)屬于小RNA病毒科、腸道病毒屬成員,為無囊膜的單股正鏈RNA病毒,病毒粒子大小為25~30nm,全長7 400~7 500bp[1],廣泛存在于人類和各類動物機(jī)體內(nèi),并且能夠引起其呼吸道系統(tǒng)和消化系統(tǒng)的疾病,比如人腸道病毒A、猴腸道病毒A、豬腸道病毒B以及牛腸道病毒等

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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本文編號：787042