本文關(guān)鍵詞：葛根素對奶牛乳腺上皮細(xì)胞炎癥模型中NF-κB信號通路的影響

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【摘要】：葛根素(puerarin,Pue)是從豆科植物葛根(Pueraria lobata)的根部提取的一種異黃酮,具抗炎作用。為探討葛根素對脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)的奶牛(Bos taurus)乳腺上皮細(xì)胞(bovine mammary epithelial cells,b MECs)炎癥的抗炎機(jī)制,本研究通過膠原酶消化法培養(yǎng)原代的b MECs,采用免疫熒光法鑒定b MECs中特有標(biāo)記物人細(xì)胞角蛋白18(cytokeratin-18,CK-18),Western blot檢測β-酪蛋白(β-casein);細(xì)胞活力檢測試劑盒(cell counting kit-8,CCΚ-8)篩選LPS刺激b MECs產(chǎn)生炎癥反應(yīng)的最佳濃度,酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)的含量變化;將b MECs分成空白對照組、炎癥模型組、葛根素藥物組和地塞米松(dexamethasone,Dex)陽性對照組,用Western blot檢測細(xì)胞中p-IκB-α、IκB-α、p-p65和p65蛋白的表達(dá)變化。研究發(fā)現(xiàn),原代培養(yǎng)的細(xì)胞中存在特異性CΚ-18和β-casein,證明其為b MECs;經(jīng)LPS刺激b MECs 24 h,炎癥模型組細(xì)胞培養(yǎng)上清中TNF-α和IL-1β的含量比空白對照組顯著升高(P0.05),證明b MECs炎癥模型建立成功;葛根素處理組細(xì)胞中p-IκB-α蛋白較炎癥模型組顯著降低(P0.05),p-p65蛋白極顯著降低(P0.01),且細(xì)胞培養(yǎng)液上清中TNF-α的含量極顯著降低(P0.01),與地塞米松陽性對照組趨勢一致,但兩組無顯著差異。結(jié)果表明,葛根素可通過抑制核轉(zhuǎn)錄因子(nuclear transcription factor-κappa B,NF-κB)信號通路的活化,降低其下游炎性因子TNF-α的表達(dá),起到抗炎作用。本研究為臨床上開發(fā)抗炎藥物及治療奶牛乳房炎打下了一定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 奶牛乳腺上皮細(xì)胞(bMECs) 脂多糖(LPS) 葛根素(Pue) 核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.31172378) 山東省農(nóng)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)崗位(No.SDAIT-12-011-03)
【分類號】：S853.7
【正文快照】： 奶牛(Bos taurus)乳房炎,通常是由病原微生物感染乳腺組織而發(fā)病,給奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失(Zhao,Lacasse,2008)。臨床上,抗生素治療奶牛乳房炎是主要手段之一,但抗生素具有易殘留、病原菌易產(chǎn)生耐藥性、毒副作用大等弊端,對新型抗炎藥物及抗炎機(jī)理的研究已成為熱點(diǎn)。中

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 吳娟;王鳳龍;王申元;;奶牛乳腺上皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年06期

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4 李U，

本文編號：766072