發(fā)布時(shí)間：2017-08-29 11:32

  本文關(guān)鍵詞：塞尼卡谷病毒TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立

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【摘要】：為建立一種快速、靈敏的塞尼卡谷病毒(SVV)檢測方法,本研究針對病毒基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)了一對引物和探針,并優(yōu)化反應(yīng)條件,建立了檢測SVV的TaqMan熒光定量PCR方法。結(jié)果表明,以重組質(zhì)粒為標(biāo)準(zhǔn)品建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線在2.8×107拷貝/μL~2.8×10~1拷貝/μL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系;該方法與口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎病毒均無交叉反應(yīng);檢測靈敏度可達(dá)2.8拷貝/μL,靈敏度高于普通PCR;批內(nèi)和批間的變異系數(shù)為1.73%~4.00%,具有良好的穩(wěn)定性。本研究建立的TaqMan熒光定量PCR方法可以用于SVV的檢測,還可以作為診斷技術(shù)儲(chǔ)備,應(yīng)對我國未來可能出現(xiàn)流行的豬原發(fā)性皰疹病。
【作者單位】： 中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心外來病研究中心;內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 塞尼卡谷病毒 熒光定量PCR TaqMan探針
【基金】：“十三五”國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(2016YFD0501104)
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV),或稱為Senecavirus A(SVA),在遺傳上與小RNA病毒科、心病毒屬病毒關(guān)系相近[1]。2015年9月以來,美國中西部多個(gè)地區(qū)的豬群發(fā)生呈水皰性病變疫情,感染豬的鼻吻、蹄冠狀帶部位出現(xiàn)水皰樣病變,偶見腹瀉癥狀,病情急促,新生仔豬病死率達(dá)30%~7

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本文編號：753073