本文關(guān)鍵詞：支鏈氨基酸和胰島素對大鼠骨骼肌細(xì)胞蛋白質(zhì)代謝的分子調(diào)控機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 支鏈氨基酸 氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體 蛋白合成 骨骼肌

【摘要】：[目的]研究支鏈氨基酸(BCAA)對大鼠骨骼肌細(xì)胞蛋白質(zhì)代謝的影響,探討氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體在BCAA調(diào)控細(xì)胞蛋白質(zhì)代謝途徑中的作用機(jī)制。[方法]用缺失支鏈氨基酸(Leu-,Ile-,Val-)的無血清高糖型DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)L6肌管細(xì)胞,先后在培養(yǎng)基質(zhì)中添加100 nmol·L-1雷帕霉素、支鏈氨基酸(Leu+,Ile+,Val+)和胎牛胰島素,RT-PCR法檢測細(xì)胞表面氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體LAT1、CD98和SNAT2以及氨基酸調(diào)控因子GCN2和ATF4 mRNA表達(dá),并結(jié)合Western-blot法考察蛋白合成關(guān)鍵因子磷酸化S6K1蛋白表達(dá)量及蛋白降解關(guān)鍵因子MuRF1和MAFbx mRNA表達(dá)水平。[結(jié)果]BCAA依賴于m TOR途徑顯著促進(jìn)磷酸化S6K1(Thr389)蛋白表達(dá)(P0.05),此過程與提高LAT1和CD98的mRNA表達(dá)水平(P0.05)有關(guān)。SNAT2在胰島素參與下,其表達(dá)量顯著增加(P0.05),并依賴于m TOR途徑;BCAA對GCN2和ATF4 mRNA水平?jīng)]有產(chǎn)生顯著影響,但能夠依賴m TOR途徑顯著提高ATF4蛋白表達(dá)量(P0.05);在沒有胰島素參與下,BCAA未能夠引起MuRF1和MAFbx表達(dá)發(fā)生變化,但在胰島素協(xié)同下,BCAA能夠使MAFbx表達(dá)顯著下降(P0.05),但該抑制效應(yīng)并不能被雷帕霉素所阻斷;無胰島素下MuRF1和MAFbx表達(dá)量顯著高于胰島素參與下的表達(dá)量(P0.05)。[結(jié)論]BCAA不依賴胰島素調(diào)控蛋白質(zhì)合成代謝,通過細(xì)胞膜氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)受體(LAT1、CD98和SNAT2)介導(dǎo),作用于m TOR途徑發(fā)揮促進(jìn)蛋白合成作用;胰島素使BCAA的促蛋白合成作用更加明顯;BCAA調(diào)控蛋白質(zhì)分解代謝過程依賴胰島素,與胰島素協(xié)同抑制蛋白降解。
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 支鏈氨基酸 氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體 蛋白合成 骨骼肌
【基金】：四川省教育廳自然科學(xué)重點(diǎn)項(xiàng)目(13ZA0288)
【分類號】：S816
【正文快照】： 氨基酸模式是引起營養(yǎng)代謝效應(yīng)發(fā)生變化的主要原因,且主要體現(xiàn)為以亮氨酸(Leu)為主的支鏈氨基酸對蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的效應(yīng)。研究表明,Leu或以Leu為主的支鏈氨基酸混合液能夠在有效地促進(jìn)骨骼肌蛋白質(zhì)合成代謝的同時,抑制蛋白質(zhì)降解,并通過細(xì)胞表面氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體(受體)識別和介

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本文編號：717062