本文關(guān)鍵詞：豬血凝性腦脊髓炎病毒重組N蛋白間接ELISA檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用

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【摘要】：為建立檢測(cè)豬血凝性腦脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)血清抗體的間接ELISA方法,構(gòu)建了高效表達(dá)PHEV核衣殼蛋白(N)的重組質(zhì)粒(pET28a-N),Western blot檢測(cè)該重組蛋白具有較好的免疫原性。以純化的N重組蛋白作為包被抗原,通過(guò)方陣試驗(yàn)確定了抗原的最適包被濃度為2mg/L,酶標(biāo)二抗的最佳稀釋倍數(shù)為1∶10 000,建立了用于PHEV抗體檢測(cè)間接ELISA方法。此外,用該法(N-ELISA)對(duì)天津市地區(qū)采集到的200份豬血清樣品進(jìn)行檢測(cè),陽(yáng)性檢出率為83.5%,與前期工作中建立的全病毒作為包被抗原的間接ELISA診斷方法 (HEV-ELISA)檢測(cè)結(jié)果的符合率為90.91%。結(jié)果表明:以重組N蛋白為包被抗原所建立的用于PHEV血清抗體檢測(cè)的方法能夠用于檢測(cè)PHEV感染及相關(guān)的流行病學(xué)調(diào)查。
【作者單位】： 吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;天津市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所;
【關(guān)鍵詞】： 豬血凝性腦脊髓炎病毒 重組N蛋白 間接ELISA 血清抗體
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31272530) 國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃資助項(xiàng)目(2016YFD0500707) 吉林省青年科研基金資助項(xiàng)目(20160520033JH)
【分類(lèi)號(hào)】：S852.65
【正文快照】： *Corresponding author,E-mail:gf86661@sohu.com豬血凝性腦脊髓炎病毒(porcine hemagglutina-ting encephalomyelitis virus,PHEV)屬于冠狀病毒科β-冠狀病毒屬成員,為不分段的單股正鏈RNA病毒,可引起仔豬發(fā)生豬血凝性腦脊髓炎(porcinehemagglutinating encephalomyelitis,PH

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3 劉隨新;石達(dá);陳建飛;張?chǎng)?時(shí)洪艷;劉孝珍;張莎;王璐;馮力;;豬流行性腹瀉病毒N蛋白核仁定位信號(hào)對(duì)宿主細(xì)胞周期的影響[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年03期

4 夏平安;尹彥濤;李素平;黨占國(guó);王建舉;王中明;李偉娟;崔保安;;豬繁殖與呼吸綜合征病毒重組N蛋白的高效表達(dá)及間接ELISA方法的建立[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2009年05期

5 孫慶申;李鑫;車(chē)小瓊;常繼濤;楊勇博;于力;;載牛冠狀病毒N蛋白殼聚糖微球的免疫效果評(píng)價(jià)[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2009年11期

6 ;[J];;年期

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1 曹守春;錢(qián)淵;朱汝南;李國(guó)華;丁雅馨;趙林青;;北京新發(fā)現(xiàn)的人偏肺病毒N蛋白的高效表達(dá)及抗原活性初步分析[A];第6次全國(guó)微生物學(xué)與免疫學(xué)大會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

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1 宋振輝;豬傳染性胃腸炎病毒全基因組克隆及N蛋白的表達(dá)[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

2 樊崢;SARS冠狀病毒PUMC02株全基因組cDNA的分段克隆及N蛋白的功能研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

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1 王貞鈞;藍(lán)舌病病毒VP7蛋白、施馬倫貝格病毒N蛋白的原核表達(dá)及間接ELISA檢測(cè)方法的建立[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：699640