本文關(guān)鍵詞：寧夏地區(qū)牛源金黃色葡萄球菌毒力基因檢測(cè)及耐藥性研究

  更多相關(guān)文章： 金黃色葡萄球菌 耐藥性 毒力基因 大環(huán)內(nèi)酯類耐藥基因 生物被膜

【摘要】：金黃色葡萄球菌廣泛的存在于自然界中,并且是一種對(duì)人與動(dòng)物都有感染性的重要病原微生物。大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(Macrolides)是一類含有大環(huán)內(nèi)酯基本化學(xué)結(jié)構(gòu)的抗生素,在臨床實(shí)踐中,常常被應(yīng)用于治療由革蘭氏陽(yáng)性菌等引起的感染。隨著大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的使用頻率越來(lái)越高,由此而產(chǎn)生的耐藥菌株也越來(lái)越多,導(dǎo)致臨床治療失敗。因此,對(duì)寧夏地區(qū)牛源性的金黃色葡萄球菌進(jìn)行耐藥性調(diào)查及毒力基因、耐藥基因和生物被膜的檢測(cè),不僅對(duì)臨床合理用藥具有指導(dǎo)意義,而且對(duì)獸醫(yī)臨床及公共衛(wèi)生都具有重要意義。本研究主要針對(duì)寧夏地區(qū)牛源金黃色葡萄球菌進(jìn)行試驗(yàn),首先采集臨床及隱性乳房炎乳樣,通過(guò)革蘭氏染色鏡檢、科瑪嘉金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基初篩、雙重PCR方法檢測(cè)16S rDNA和nuc基因進(jìn)行金黃色葡萄球菌的鑒定,再根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)推薦的肉湯微量稀釋法,選用18種抗菌藥物對(duì)所分離鑒定出的金黃色葡萄球菌進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)。結(jié)果顯示,共分離鑒定出231株金黃色葡萄球菌,分離率達(dá)到16.84%;所分離的菌株對(duì)18種抗菌藥物呈現(xiàn)出不同程度的耐藥,耐藥率最高的是氨芐西林,達(dá)到79.2%,其次是青霉素(77.9%)、復(fù)方新諾明(65.4%),對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類藥物的耐藥率在40%左右,但對(duì)阿莫西林-克拉維酸、頭孢唑林、阿米卡星、多西環(huán)素的敏感率較高,對(duì)喹諾酮類藥物和氨基糖苷類藥物的敏感率達(dá)60%-89%。所分離的菌株主要以4、5、6、7耐居多,所占比例分別為22.5%、12.1%、11.3%、12.1%,分離菌株最多可耐受的抗菌藥物達(dá)到16種,多藥耐藥率達(dá)到84.8%。運(yùn)用PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)231株金黃色葡萄球菌進(jìn)行毒力基因及大環(huán)內(nèi)酯類耐藥基因的檢測(cè),結(jié)果顯示,7種毒力基因hla、hlb、clfa、pvl、sea、seb、sec的檢出率分別為99.1%(229/231)、97.8%(226/231)、98.7%(228/231)、2.6%(6/231)、27.7%(64/231)、29.0%(69/231)、5.6%(13/231)。介導(dǎo)主動(dòng)泵出系統(tǒng)的msrA耐藥基因和可使作用靶位發(fā)生變化的ermC耐藥基因檢出率分別為55.3%、67.5%。由此可知,寧夏地區(qū)牛源金黃色葡萄球菌毒力基因主要流行基因型為hla、hlb、clfa。采用雙紙片法對(duì)31株耐藥表型為紅霉素耐藥且克林霉素敏感的金黃色葡萄球菌進(jìn)行誘導(dǎo)耐藥性的檢測(cè),結(jié)果顯示,D試驗(yàn)的陽(yáng)性率為90.3%(28/31)。采用剛果紅法對(duì)231株金黃色葡萄球菌進(jìn)行生物被膜形成能力的檢測(cè),其中有112株受試菌都具有形成生物被膜的能力,陽(yáng)性率達(dá)到48.5%。綜上所述,本研究通過(guò)對(duì)寧夏地區(qū)牛源金黃色葡萄球菌進(jìn)行耐藥性和毒力基因的研究以及對(duì)其生物被膜形成能力的初步檢測(cè),揭示了金黃色葡萄球菌在寧夏地區(qū)奶牛場(chǎng)的耐藥情況和耐藥特征,為指導(dǎo)臨床合理用藥和控制耐藥菌的擴(kuò)散提供理論依據(jù),并為進(jìn)一步研究細(xì)菌的耐藥機(jī)制打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：金黃色葡萄球菌 耐藥性 毒力基因 大環(huán)內(nèi)酯類耐藥基因 生物被膜
【學(xué)位授予單位】：寧夏大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S852.611
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-11
• 縮略詞表11-12
• 第一章 文獻(xiàn)綜述12-22
• 1.1 研究目的和意義12
• 1.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀12-20
• 1.3 研究?jī)?nèi)容與方法20-22
• 第二章 金黃色葡萄球菌的分離鑒定及耐藥性調(diào)查22-33
• 2.1 試驗(yàn)材料22-25
• 2.2 試驗(yàn)方法25-28
• 2.3 試驗(yàn)結(jié)果28-31
• 2.4 分析與討論31-32
• 2.5 小結(jié)32-33
• 第三章 金黃色葡萄球菌的毒力基因檢測(cè)33-41
• 3.1 試驗(yàn)材料33-34
• 3.2 試驗(yàn)方法34-36
• 3.3 試驗(yàn)結(jié)果36-39
• 3.4 分析與討論39-40
• 3.5 小結(jié)40-41
• 第四章 金黃色葡萄球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥基因檢測(cè)及誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)41-49
• 4.1 試驗(yàn)材料41-43
• 4.2 試驗(yàn)方法43-44
• 4.3 試驗(yàn)結(jié)果44-46
• 4.4 分析與討論46-48
• 4.5 小結(jié)48-49
• 第五章 金黃色葡萄球菌生物被膜形成能力的檢測(cè)49-53
• 5.1 試驗(yàn)材料49-50
• 5.2 試驗(yàn)方法50
• 5.3 試驗(yàn)結(jié)果50
• 5.4 分析與討論50-51
• 5.5 小結(jié)51-53
• 第六章 結(jié)論53-54
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 附錄58-67
• 致謝67-68
• 個(gè)人簡(jiǎn)介68

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 高正琴,邢華,李厚達(dá);PCR技術(shù)在檢測(cè)鼠金黃色葡萄球菌中的應(yīng)用研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2003年01期

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本文編號(hào)：697160