發(fā)布時間：2017-08-17 00:15

  本文關(guān)鍵詞：日糧銅源及其水平對生長豬肝臟銅轉(zhuǎn)運(yùn)的影響

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【摘要】：銅是動物機(jī)體所必需的微量元素之一,在動物內(nèi)具有多種生物學(xué)功能,它是金屬酶的組成成分,作為電子受體或供體參與機(jī)體內(nèi)多種重要的生理、生化反應(yīng)。因此,維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境銅的穩(wěn)定性,對動物機(jī)體內(nèi)銅代謝均衡具有顯著的作用。機(jī)體對銅的攝取、吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和排泄是一個非常復(fù)雜的過程,同時受日糧銅源及其添加水平的影響。本試驗(yàn)通過研究日糧銅源及其水平對生長豬肝臟損傷及肝臟銅轉(zhuǎn)運(yùn)的影響,解明日糧銅來源及其水平與肝銅轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)系,進(jìn)一步完善高銅促生長機(jī)制的理論。本試驗(yàn)采取2×2析因設(shè)計,隨機(jī)選取60頭(約45日齡),遺傳背景相同、胎次相近、公母各半,體重14.00±0.30 kg的三元雜交健康仔豬,隨機(jī)分為四個處理組,每組5個重復(fù),每個重復(fù)3頭。研究日糧銅源(硫酸銅,氨基酸銅)及水平(150,300 mg/kg)對生長豬肝臟銅轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。試驗(yàn)一日糧銅源及其水平對生長豬肝臟損傷的影響1.血清銅含量隨日糧銅添加水平的升高顯著升高(p0.01),銅源間未產(chǎn)生顯著影響(p0.05);肝銅、腎銅和糞銅含量隨日糧銅添加水平的升高而顯著升高(p0.01),銅源間未產(chǎn)生顯著影響(p0.05);日糧銅源間及其添加水平肌肉銅含量差異顯著(p0.05)。2.肝臟亞細(xì)胞器內(nèi)銅含量隨日糧銅水平的升高而顯著增加。線粒體內(nèi)銅含量,日糧銅添加水平間差異顯著(p0.01),銅源間差異不顯著(p0.05);溶酶體銅含量和胞漿銅含量與線粒體銅含量變化趨勢相似。溶酶體內(nèi)酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,ACP)的活性,銅添加水平為150 mg/kg和300mg/kg差異不顯著(p0.05),但胞漿內(nèi)ACP的活性卻著顯升高(p0.01);隨著銅添加水平升高溶酶體及胞漿內(nèi)β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase)活性顯著升高(p0.01);溶酶體內(nèi)組織蛋白酶D(Cathepsin D,CTSD)的活性銅添加水平為150 mg/kg和300mg/kg差異不顯著(p0.05),胞漿內(nèi)CTSD的活性著顯升高(p0.01);改變?nèi)苊阁w內(nèi)環(huán)境改變,p H發(fā)生變化,溶酶體細(xì)胞膜得通透性增大,使溶酶體內(nèi)ACP和CTSD進(jìn)入胞漿中,在此過程需要ATP供應(yīng),使胞漿內(nèi)酸性磷酸酶、組織蛋白酶D活性顯著增加。ACP、CTSD和β-glucosidase的活性銅源間未產(chǎn)生顯著變化(p0.05)。試驗(yàn)二日糧銅源及其水平對生長豬肝臟銅轉(zhuǎn)運(yùn)因子基因m RNA表達(dá)的影響采用Real Time Quantitative PCR(RT-PCR)中的SYBR Green I熒光染料嵌合法,檢測日糧銅源及其添加水平對生長豬肝臟銅轉(zhuǎn)運(yùn)因子Ctr1、ATP7A及ATP7B m RNA表達(dá)量的影響。肝臟內(nèi)銅轉(zhuǎn)運(yùn)因子Ctr1、ATP7A及ATP7B基因m RNA均有一定的表達(dá),其中日糧中添加150mg/kg(硫酸銅,氨基酸銅)的銅Ctr1、ATP7B m RNA的表達(dá)量最高;日糧中150mg/kg(硫酸銅,氨基酸銅),ATP7A的表達(dá)未產(chǎn)生顯著影響(p0.05);300 mg/kg日糧(硫酸銅,氨基酸銅)顯著降低Ctr1、ATP7B基因m RNA的表達(dá)量(p0.01);日糧中300 mg/kg銅ATP7A的表達(dá)未產(chǎn)生顯著影響(p0.05)。綜上所述,隨日糧銅水平升高顯著增加了機(jī)體內(nèi)肝銅、血清銅及肝臟亞細(xì)胞器銅含量,溶酶體及胞漿內(nèi)β-glucosidase活性顯著增加,溶酶體內(nèi)的ACP、CTSD未顯著升高,而胞漿內(nèi)ACP、CTSD、β-glucosidase顯著升高,銅源間差異不顯著。可能由于日糧高銅使肝銅含量顯著增加,亞細(xì)胞器內(nèi)溶酶體銅含量顯著增加,溶酶體內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變,PH發(fā)生變化,使溶酶體膜穩(wěn)定性下降且膜通透性增大,致使溶酶體內(nèi)酸性磷酸酶、組織蛋白酶-D釋放進(jìn)入胞漿,使胞漿內(nèi)酸性磷酸酶和組織蛋白酶-D活性顯著提高,對肝臟造成損傷,肝臟正常功能遭到破壞,促進(jìn)肝內(nèi)銅的排泄,使腎臟及糞中銅含量升高。銅添加水平為150mg/kg組的銅轉(zhuǎn)運(yùn)因子Ctr1、ATP7B m RNA的表達(dá)量最高;銅添加水平為300mg/kg組抑制銅轉(zhuǎn)運(yùn)因子Ctr1、ATP7B m RNA的表達(dá),銅源間對銅轉(zhuǎn)運(yùn)因子Ctr1、ATP7B m RNA的表達(dá)無顯著影響。
【關(guān)鍵詞】：硫酸銅 氨基酸銅 生長豬 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 P型ATP酶
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S828.5
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 前言8-10
• 第一篇 文獻(xiàn)綜述10-15
• 1.1 機(jī)體內(nèi)銅轉(zhuǎn)運(yùn)的研究進(jìn)展10-14
• 1.2 研究目的及意義14-15
• 第二篇 研究內(nèi)容15-33
• 第一章 日糧銅源及其水平對生長豬肝臟損傷及酶活性的影響15-24
• 1.1 材料15
• 1.2 試驗(yàn)設(shè)計與日糧配方15-16
• 1.3 樣本采集16-17
• 1.4 測試指標(biāo)及方法17-18
• 1.5 數(shù)據(jù)分析18
• 1.6 結(jié)果18-21
• 1.7 討論21-23
• 1.8 小結(jié)23-24
• 第二章 日糧銅源及其水平對銅轉(zhuǎn)運(yùn)因子m RNA表達(dá)量的影響24-33
• 2.1 試驗(yàn)動物24
• 2.2 試驗(yàn)設(shè)計與日糧24
• 2.3 材料與方法24-28
• 2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析28
• 2.5 結(jié)果與分析28-30
• 2.6 討論30-32
• 2.7 小結(jié)32-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-40
• 作者簡介40-41
• 致謝41

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本文編號：686219