本文關(guān)鍵詞：雞miR-19a、miR-19b通過靶向抑制LIN9促進(jìn)前脂肪細(xì)胞增殖

  更多相關(guān)文章： miR--基因簇 LIN 細(xì)胞增殖 雞前脂肪細(xì)胞

【摘要】：miR-17-92基因簇編碼包括miR-19a、miR-19b在內(nèi)的至少6個(gè)miRNA,在雞細(xì)胞的增殖、分化、凋亡及發(fā)育等多種生物學(xué)過程中發(fā)揮重要作用,但其作用機(jī)制尚不清楚。生物信息學(xué)分析顯示,細(xì)胞周期調(diào)控子LIN9是miR-17-92基因簇成員miR-19a和miR-19b的潛在靶點(diǎn)。為驗(yàn)證這一預(yù)測,構(gòu)建含野生型LIN9 3'-UTR熒光素酶報(bào)告基因載體(psi-CHECK2-LIN9-3'-UTR-WT)及突變型報(bào)告基因載體(psi-CHECK2-LIN9-3'-UTR-MUT),開展靶標(biāo)LIN9的鑒定。復(fù)合轉(zhuǎn)染結(jié)合報(bào)告基因酶活性測定結(jié)果表明,過表達(dá)miR-19a和miR-19b能顯著抑制含野生型LIN9 3'-UTR的報(bào)告基因表達(dá),而過表達(dá)miR-19a和miR-19b抑制劑顯著提高野生型LIN9 3'-UTR報(bào)告基因的表達(dá)。實(shí)時(shí)定量PCR(RT-q PCR)證明,miR-19a和miR-19b抑制劑對內(nèi)源性LIN9 mRNA的表達(dá)沒有影響,提示miR-19a和miR-19b可能不是通過降解mRNA調(diào)控LIN9表達(dá)。轉(zhuǎn)染結(jié)合CCK-8細(xì)胞增殖分析顯示,在雞前脂肪細(xì)胞過表達(dá)LIN9明顯抑制細(xì)胞增殖。與此相一致的是,細(xì)胞增殖標(biāo)志分子Cyclin D1、c-Myc、PCNA、Ki67的mRNA表達(dá)量明顯降低。本研究證實(shí),LIN9是miR-17-92基因簇成員miR-19a和miR-19b的靶標(biāo),同時(shí)證實(shí),LIN9抑制雞前脂肪細(xì)胞的增殖。是否miR-17-92基因簇編碼的其它mi-RNA成員也以LIN9為靶標(biāo)尚不得而知,我室正在研究中。
【作者單位】： 農(nóng)業(yè)部雞遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;黑龍江省普通高等學(xué)校動(dòng)物遺傳育種與繁殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： miR--基因簇 LIN 細(xì)胞增殖 雞前脂肪細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31372299) 農(nóng)業(yè)部產(chǎn)業(yè)體系(No.CARS-42)資助~~
【分類號】：Q78;S831
【正文快照】： *聯(lián)系人Tel:0451-55191770;E-mail:wangning@neau.edu.cn##并列第一作者Received:March 7,2016;Revised:May 14,2016;Accepted:May 24,2016Supported by National Natural Science Foundation of China(No.31372299)and Project from Department of Agriculture Technology Sy

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