本文關(guān)鍵詞：三江平原野鳥AIV、NDV監(jiān)測及病毒體內(nèi)分布研究

  更多相關(guān)文章： 禽流感 新城疫 監(jiān)測 熒光定量 生態(tài)位

【摘要】：禽流感是由禽流感病毒(Avian Influenza virus)引起的以禽類為主的傳染性疫病。新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus)引起的也是以感染禽類為主的烈性傳染病。兩種疫病都曾發(fā)生多次大爆發(fā),不僅危害養(yǎng)禽業(yè)也能感染人類。禽流感及新城疫是危害最為嚴(yán)重的兩種禽類疫病。每當(dāng)該病爆發(fā)常常會引起巨大的經(jīng)濟(jì)損失。對兩種疫病的研究一直都是熱點并且越來越深入。本論在2013年至2015年間對三江平原地區(qū)兩種疫病進(jìn)行監(jiān)測研究并對混合感染的病例進(jìn)行分析研究。野鳥是禽流感病毒和新城疫病毒的天然宿主,野生候鳥具有遷徙習(xí)性可攜帶病毒到其他地方導(dǎo)致疫病傳播和爆發(fā)。因此對野鳥的流行病學(xué)監(jiān)測對了解疫病的分布和進(jìn)行預(yù)防都具有重要意義。本研究對三江平原地區(qū)的野生鳥類進(jìn)行了為期2年的禽流感及新城疫流行病學(xué)調(diào)查,共采集野鳥樣品1770份,其中有15份樣品呈AIV陽性,病毒總分離率為0.85%,4份樣品呈NDV陽性,病毒總分離率為0.23%。AIV及NDV的分離率均較低,H16N3亞型為三江平原地區(qū)禽流感病毒的的優(yōu)勢亞型。在兩種病毒的流行病學(xué)監(jiān)測中,兩種病毒混合感染的病例較常見。而目前關(guān)于禽流感和新城疫兩種病毒混合感染的生態(tài)學(xué)意義尚不清楚,因此為研究野鳥中兩種病毒混合感染時在體內(nèi)的分布情況,本研究分析了實驗室采集于2011年10月份向海地區(qū)采集的12只野鴨臟器樣品,AIV及NDV的PCR鑒定均為陽性。本研究采用絕對熒光定量絕方法以及生態(tài)位概念對其進(jìn)行分析,探索兩種病毒在野鳥體內(nèi)的生態(tài)位關(guān)系,進(jìn)而揭示了在混合感染時兩種病毒的分布規(guī)律以及生態(tài)位情況�；旌细腥镜囊傍喼蠥IV生態(tài)位大于NDV生態(tài)位并且AIV及NDV主要分布于呼吸系統(tǒng)。
【關(guān)鍵詞】：禽流感 新城疫 監(jiān)測 熒光定量 生態(tài)位
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S852.65
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-12
• 1 緒論12-17
• 1.1 禽流感病毒12-13
• 1.2 新城疫病毒13-14
• 1.3 熒光定量PCR14-15
• 1.4 生態(tài)位15-16
• 1.5 本課題研究的目的和意義16-17
• 2 實驗1 三江平原野生鳥類禽流感病毒與新城疫病毒的監(jiān)測研究17-25
• 2.1 實驗材料17-18
• 2.1.1 樣品來源17
• 2.1.2 實驗試劑17-18
• 2.1.3 實驗儀器18
• 2.1.4 雞胚及紅細(xì)胞18
• 2.2 實驗方法18-21
• 2.2.1 樣品采集18-19
• 2.2.2 樣品處理19
• 2.2.3 病毒的分離19
• 2.2.4 血凝實驗19
• 2.2.5 引物19
• 2.2.6 提取病毒RNA19
• 2.2.7 反轉(zhuǎn)錄19-20
• 2.2.8 PCR20-21
• 2.2.9 AIV血凝素亞型及神經(jīng)氨酸酶亞型鑒定21
• 2.3 實驗結(jié)果21-23
• 2.3.1 病毒分離結(jié)果21-22
• 2.3.2 AIV亞型的鑒定結(jié)果22-23
• 2.3.3 HA和NA亞型分布23
• 2.4 討論23-24
• 2.5 小結(jié)24-25
• 3 實驗2 AIV與NDV混合感染檢測與分析25-61
• 3.1 標(biāo)準(zhǔn)品制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立25-29
• 3.1.1 實驗材料25
• 3.1.2 實驗方法-AIV標(biāo)準(zhǔn)品制備25-27
• 3.1.3 實驗方法-AIV標(biāo)準(zhǔn)曲線建立27-28
• 3.1.4 實驗方法-NDV標(biāo)準(zhǔn)品制備28
• 3.1.5 實驗方法-NDV標(biāo)準(zhǔn)曲線建立28-29
• 3.2 特異性、靈敏性、重復(fù)性驗證29-30
• 3.2.1 實驗方法-特異性實驗29
• 3.2.2 實驗方法-敏感性實驗29-30
• 3.2.3 實驗方法-重復(fù)性實驗30
• 3.3 樣品檢測30-31
• 3.3.1 實驗材料30-31
• 3.3.2 實驗方法31
• 3.4 結(jié)果31-57
• 3.4.1 PCR鑒定結(jié)果31-32
• 3.4.2 PCR產(chǎn)物膠回收結(jié)果32
• 3.4.3 菌液鑒定結(jié)果32-33
• 3.4.4 菌液測序結(jié)果33
• 3.4.5 質(zhì)粒酶切結(jié)果33
• 3.4.6 質(zhì)粒單切膠回收純化后濃度測定結(jié)果33-35
• 3.4.7 熒光定量PCR引物濃度優(yōu)化結(jié)果35-36
• 3.4.8 熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線建立結(jié)果36-38
• 3.4.9 標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)分析38-39
• 3.4.10 特異性實驗結(jié)果39-40
• 3.4.11 敏感性實驗結(jié)果40-46
• 3.4.12 重復(fù)性實驗結(jié)果46-47
• 3.4.13 樣品熒光定量檢測結(jié)果47-49
• 3.4.14 樣品濃度49-55
• 3.4.15 生態(tài)位寬度及生態(tài)位重疊值55-57
• 3.5 討論57-60
• 3.5.1 標(biāo)準(zhǔn)品及熒光染料的選擇57
• 3.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線滿足特異性、敏感性及重復(fù)性57-58
• 3.5.3 AIV及NDV主要分布呼吸系統(tǒng)58-60
• 3.6 小結(jié)60-61
• 結(jié)論61-62
• 參考文獻(xiàn)62-66
• 附錄：三江平原采樣明細(xì)表66-68
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文68-69
• 致謝69-70

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李德志;石強(qiáng);臧潤國;王緒平;盛麗娟;朱志玲;王長愛;;物種或種群生態(tài)位寬度與生態(tài)位重疊的計測模型[J];林業(yè)科學(xué);2006年07期

，

本文編號：649434