2014-2015年我國(guó)部分地區(qū)候鳥(niǎo)禽流感病毒的鑒定及序列分析
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更多相關(guān)文章: 禽流感病毒 候鳥(niǎo) 遺傳進(jìn)化 序列分析
【摘要】:禽流感病毒屬于正黏病毒科,流感病毒屬,為單股、負(fù)鏈、分節(jié)段RNA病毒。作為A型禽流感病毒的自然宿主,候鳥(niǎo)通過(guò)遷徙為病毒的傳播、感染以及變異重排提供有利條件。因此,開(kāi)展候鳥(niǎo)禽流感監(jiān)測(cè),不僅對(duì)闡明禽流感病毒在其自然宿主中的流行病學(xué)情況具有重要意義,還能為家禽和人禽流感的監(jiān)測(cè)與預(yù)警工作提供重要參考依據(jù)。為了解禽流感病毒(AIV)的遺傳進(jìn)化關(guān)系和相關(guān)生物學(xué)特性,本研究室自2014年起,先后從我國(guó)吉林省、河南省、河北省、湖南省、青海省、內(nèi)蒙古等中國(guó)部分地區(qū)采集多種候鳥(niǎo)的拭子、糞便等7447份樣品中分離出H4N6、H5N1、H5N6、H5N8、H6N5、H9N2、H9N7、H13N6、H13N8亞型流感病毒37株,本研究選擇其中公共衛(wèi)生意義重大的H5N1亞型4株、H5N6亞型2株、H10N7亞型1株并對(duì)分離到的這7株AIVs進(jìn)行了一系列分析研究,包括全基因組序列測(cè)定、遺傳進(jìn)化分析以及重排與變異分析。4株H5N1亞型AIVs遺傳進(jìn)化分析表明,均屬于2.3.2.1C譜系,形成獨(dú)立的分支且彼此具有很高親緣關(guān)系。序列分析表明,4株AIVs的HA蛋白的裂解位點(diǎn)(R-R-R-K/-/R-G)符合高致病性禽流感的分子生物學(xué)特征;HA蛋白大部分受體結(jié)合位點(diǎn)均比較保守,但個(gè)別位點(diǎn)發(fā)生了變異,可能會(huì)導(dǎo)致AIVs分離株的宿主感染譜進(jìn)一步增大。4株AIVs NA蛋白具有3個(gè)潛在的糖基化位點(diǎn)且莖部均缺失20個(gè)氨基酸。4株H5N1亞型AIVs分離株均發(fā)生了NA基因I314V、M2基因V27A的突變,因此從分子水平推測(cè)這些毒株可能會(huì)對(duì)神經(jīng)氨酸酶抑制劑和M2離子通道抑制劑產(chǎn)生一定的耐藥性。NS氨基酸序列第80-84位缺失5個(gè)氨基酸,提示病毒具有抗干擾素活性。H5N6亞型AIVs分離株遺傳進(jìn)化分析表明該毒株為近年來(lái)新變異的2.3.4.4譜系。其中,H5N6亞型AIV長(zhǎng)沙分離株(A/Peacock/Hunan/HN-1/2015)為H5N8和H5N6重排毒株。2株H5N6亞型AIVs分離株HA蛋白的裂解位點(diǎn)(R-R-R-K/-/R-G)符合高致病性禽流感病毒特征;長(zhǎng)沙株病毒HA蛋白受體結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生了K205N、Q208K變異,且該毒株HA蛋白糖基化位點(diǎn)在209(NPT)發(fā)生了缺失。2株AIVs NA氨基酸序列在13-19位多7個(gè)氨基酸,NA氨基酸莖部56-74位缺失19個(gè)氨基酸。常德分離株NS氨基酸序列于79-84位發(fā)生6個(gè)氨基酸的缺失變異,而長(zhǎng)沙分離株未發(fā)生缺失變異。在耐藥性方面,兩株病毒的NA基因均發(fā)生了V116A、I117V、I314V變異,提示病毒對(duì)神經(jīng)氨酸酶抑制劑均產(chǎn)生了一定耐藥性。2株AIVs M2相關(guān)位點(diǎn)均未發(fā)生相關(guān)變異,表明M2離子通道抑制劑仍然對(duì)該亞型產(chǎn)生有效的抑制作用。H10N7亞型AIV分離株遺傳進(jìn)化分析表明該分離株屬于歐亞譜系,且與多種亞型流感病毒株相應(yīng)基因節(jié)段相似性很高,表明該分離株可能為一株多源重組流感病毒。序列分析表明其HA蛋白裂解位點(diǎn)(NVPEL-QGR/G)符合低致病禽流感病毒株的特征,且具有226Q、228G位點(diǎn)表明其更容易結(jié)合a-2,3受體,具有禽樣受體結(jié)合特性。存在6個(gè)潛在的糖基化位點(diǎn),沒(méi)有發(fā)生缺失或突變。本研究表明,候鳥(niǎo)中發(fā)現(xiàn)的H5N1、H5N6和H10N7表現(xiàn)出明顯重排與變異,提示加強(qiáng)候鳥(niǎo)禽流感的監(jiān)測(cè)對(duì)禽流感綜合防控具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】:禽流感病毒 候鳥(niǎo) 遺傳進(jìn)化 序列分析
【學(xué)位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S852.65
【目錄】:
- 摘要3-5
- Abstract5-7
- 英文縮寫(xiě)詞表7-9
- 前言9-10
- 第一篇 文獻(xiàn)綜述10-16
- 1.1 候鳥(niǎo)遷徙與禽流感病毒傳播的關(guān)系10-11
- 1.2 禽流感的流行情況11-13
- 1.3 禽流感病毒致病力和傳播能力相關(guān)分子基礎(chǔ)13-15
- 1.4 禽流感病毒耐藥性相關(guān)分子基礎(chǔ)15-16
- 第二篇 研究?jī)?nèi)容16-82
- 第一章 H5N1亞型AIV鑒定及基因序列分析16-45
- 1.1 材料與方法16-17
- 1.2 實(shí)驗(yàn)方法17-23
- 1.3 結(jié)果23-42
- 1.4 討論42-45
- 第二章 H5N6亞型AIV鑒定及基因序列分析45-68
- 2.1 材料與方法45
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法45-46
- 2.3 結(jié)果46-66
- 2.4 討論66-68
- 第三章 H10N7亞型AIV鑒定及基因序列分析68-82
- 3.1 材料與方法68
- 3.2 實(shí)驗(yàn)方法68-69
- 3.3 結(jié)果69-80
- 3.4 討論80-82
- 結(jié)論82-83
- 參考文獻(xiàn)83-88
- 作者簡(jiǎn)介88-89
- 致謝89
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