發(fā)布時(shí)間：2017-08-06 07:10

  本文關(guān)鍵詞：牦牛GDF9和BMP15基因的克隆、表達(dá)分析及miRNA研究

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【摘要】：以牦牛GDF9和BMP15基因?yàn)檠芯繉?duì)象,采用PCR方法分別克隆出GDF9和BMP15的兩個(gè)外顯子片段,RT-PCR方法分析了GDF9和BMP15及靶定mi RNA在各組織中的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,克隆擴(kuò)增獲得外顯子區(qū)進(jìn)行生物信息學(xué)分析。牦牛GDF9基因外顯子片段長(zhǎng)分別411 bp和1 082 bp,編碼453個(gè)氨基酸;BMP15基因外顯子片段長(zhǎng)分別為323 bp和802 bp,編碼372個(gè)氨基酸。GDF9編碼蛋白是親水蛋白,含有一個(gè)信號(hào)肽和15個(gè)潛在磷酸化位點(diǎn);BMP15編碼蛋白是親水蛋白,不含信號(hào)肽,有6個(gè)潛在磷酸化位點(diǎn)。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分析牦牛GDF9和BMP15基因在不同組織中的表達(dá)量,結(jié)果表明GDF9在卵巢和子宮中表達(dá)相對(duì)較高,且卵巢表達(dá)顯著高于其他組織,心、腎、胰和脾中無(wú)表達(dá)。BMP15僅在卵巢中表達(dá)。Target Scan預(yù)測(cè)靶定牦牛GDF9和BMP15基因的靶定mi RNA,分析GDF9靶基因bta-mi R-193a-3p和bta-mi R-193b在心、脾、肺、腎和子宮中的表達(dá)量,結(jié)果顯示bta-mi R-193a-3p脾中表達(dá)量顯著高于其他組織,但在心、肺和子宮中均不表達(dá)。bta-mi R-193b在心和腎中沒(méi)檢測(cè)到表達(dá),在肺中的表達(dá)量顯著低于脾和子宮中。
【作者單位】： 西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所;甘肅省牦牛繁育工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 牦牛 GDF BMP miRNA
【基金】：西北民族大學(xué)研究生科研創(chuàng)新項(xiàng)目(ycx14166) 甘肅省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究與應(yīng)用開發(fā)項(xiàng)目(GNSW-2011-23)
【分類號(hào)】：S823.85
【正文快照】： 生長(zhǎng)轉(zhuǎn)化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF9)和骨形態(tài)發(fā)生蛋白15(Bone morphogeneticprotein 15,BMP15)都作為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)超家族的成員,參與早期卵泡的生長(zhǎng)和分化。1978年TGF-β由Delarco和Todaro在研究病毒時(shí)發(fā)現(xiàn),它因具有促進(jìn)單層培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化并

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