本文關(guān)鍵詞：復(fù)方中藥對(duì)肉雞腹水綜合征肺動(dòng)脈血管平滑肌表型轉(zhuǎn)化活性因子的作用

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【摘要】：目的：肉雞腹水綜合征(Ascites syndrome,AS)是一種致死性營養(yǎng)代謝疾病,其病機(jī)復(fù)雜,病因繁多,致死率高。對(duì)于該病目前仍沒有統(tǒng)一的發(fā)病機(jī)制學(xué)說,給世界范圍內(nèi)的規(guī)�；虡I(yè)肉雞的飼養(yǎng)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。肺動(dòng)脈高壓已被證明是肉雞腹水綜合征的關(guān)鍵環(huán)節(jié),血管病變是機(jī)體引發(fā)肺動(dòng)脈高壓的起始因素。探索從血管生理病理學(xué)的角度解釋肺動(dòng)脈高壓乃至肉雞腹水綜合征的發(fā)病機(jī)理有著極其重要的意義。通過檢測(cè)平滑肌表型轉(zhuǎn)化相關(guān)因子Myocardin、SM22a和KLF-4基因和蛋白的含量,研究復(fù)方中藥以及平滑肌表型轉(zhuǎn)化在以肺動(dòng)脈高壓為主要環(huán)節(jié)的肉雞腹水綜合征中起到的作用。本課題通過多因素法成功建立肉雞腹水綜合征模型,將330羽8日齡試驗(yàn)肉雞隨機(jī)分為6組：空白組、AS模型組、復(fù)方中藥高劑組(2mL/kg·d)、復(fù)方中藥中劑組(1mL/kg·d)、\復(fù)方中藥低劑組(0.5mL/kg·d)和L-Arg藥物組(1% L-Arg)。于15、25、35、45日齡,每組隨機(jī)抽取5羽,病理解剖并取心肺組織,檢測(cè)腹水心臟指數(shù)(Ascites heart index, AHI),用三色染色法(Masson)觀察肉雞肺動(dòng)脈形態(tài)學(xué)上的結(jié)構(gòu),采用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)不同日齡肉雞肺動(dòng)脈血管Myocardin SM22 a和KLF-4的含量;通過ELISA法檢測(cè)各個(gè)日齡肉雞肺動(dòng)脈Myocardin、SM22 α和KLF-4蛋白含量。初步探討肺動(dòng)脈血管平滑肌表型轉(zhuǎn)化活性因子在肉雞腹水綜合征病變中的作用以及復(fù)方中藥對(duì)肉雞腹水綜合征的防治機(jī)理。結(jié)果如下：1.與空白組相比,15、25、35、45日齡模型組肺動(dòng)脈血管彈內(nèi)膜腫脹,肌纖維雜亂斷裂,向內(nèi)膜突起。與模型組相比,復(fù)方中藥高劑量組,復(fù)方中藥中劑量,復(fù)方中藥低劑量組以及L-Arg組在不同的日齡存在不同程度的修復(fù)內(nèi)皮以及平滑肌的功能。說明肉雞腹水綜合征中平滑肌病變,復(fù)方中藥在抑制平滑肌病變過程有重要的作用。2.熒光定量PCR結(jié)果表明,與空白組相比,模型組15、35和45日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4基因顯著升高(P0.05),15、25、35和45日齡肺動(dòng)脈血管SM22α與Myocardin基因顯著降低(P0.05)：與模型組相比,復(fù)方中藥高劑量組15、35和45日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4基因顯著降低(P0.05),15、25、35和45日齡肺動(dòng)脈血管SM2α與Myocardin基因顯著升高(P0.05)：復(fù)方中藥中劑量組15和35日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4顯著降低(P0.05),35和45日齡肺動(dòng)脈血管Myocardin基因顯著升高(P0.05)，15、25、35和45日齡肺動(dòng)脈血管SM22α基因顯著升高(P0.05);復(fù)方中藥低劑量組35日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4顯著降低(P0.05),25和35日齡肺動(dòng)脈血管SM22a基因顯著升高(P0.05)：L-Arg組15、35和45日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4基因顯著降低(P0.05),15、35和45日齡肺動(dòng)脈血管Myocardin基因顯著升高(P0.05),15、25、35和45日齡肺動(dòng)脈血管SM22α基因顯著升高(P0.05)3.Elisa結(jié)果表明,與空白組相比,模型組15、25和35日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4蛋白顯著升高(P0.05),15、25、35和45日齡肺動(dòng)脈血管SM22α和Myocardin蛋白顯著降低(P0.05)：與模型組相比,復(fù)方中藥高劑量組25和35日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4蛋白顯著降低(P0.05),15和25日齡動(dòng)脈血管SM22a蛋白顯著升高(P0.05),15、25和35日齡動(dòng)脈血管Myocardin蛋白顯著升高(P0.05);復(fù)方中藥中劑量組15日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4蛋白顯著降低(P0.05),15、25和35日齡肺動(dòng)脈血管Myocardin顯著升高(P0.05),15、25、35和45日齡肺動(dòng)脈血管SM22α蛋白顯著升高(P0.05)；復(fù)方中藥低劑量組15和25日齡肺動(dòng)脈血管Myocardin蛋白顯著升高(P0.05),15、25和45日齡肺動(dòng)脈血管SM22a蛋白顯著升高(P0.05);L-Arg組15、25和35日齡肺動(dòng)脈血管KLF-4蛋白顯著降低(P0.05),15、25和35日齡肺動(dòng)脈血管Myocardin和SM22a蛋白顯著升高(P0.05)結(jié)論：1.血管平滑肌表型轉(zhuǎn)化因子myocardin、KLF-4、sm22 a參與了肉雞腹水綜合征病理發(fā)生發(fā)展。2.復(fù)方中藥可以通過抑制動(dòng)脈血管平滑肌表型轉(zhuǎn)化來有效防治肉雞腹水綜合征。3.L-Arg可以通過抑制動(dòng)脈血管平滑肌表型轉(zhuǎn)化來有效防治肉雞腹水綜合征。
【關(guān)鍵詞】：復(fù)方中藥 肉雞腹水綜合征 SM22α和KLF4 Myocardin
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S858.31
【目錄】：

• 摘要8-10
• 文獻(xiàn)綜述10-20
• 1 肉雞腹水綜合征10
• 2. 肺動(dòng)脈高壓10-15
• 2.1 肺動(dòng)脈高壓病理生理學(xué)11
• 2.2 肺動(dòng)脈高壓的分子靶點(diǎn)11-15
• 2.2.1 內(nèi)皮素(ET)11-12
• 2.2.2 前列環(huán)素(PGI)12
• 2.2.3 氧化應(yīng)激12-13
• 2.2.4 氣體分子13-14
• 2.2.5 離子通道14
• 2.2.6 炎癥機(jī)制14-15
• 3 血管平滑肌細(xì)胞表型及轉(zhuǎn)化15-20
• 3.1 平滑肌細(xì)胞生理特點(diǎn)15-17
• 3.2 平滑肌細(xì)胞標(biāo)記基因17
• 3.3 血管平滑肌表型轉(zhuǎn)變的機(jī)制17-19
• 3.4 VSMC表型轉(zhuǎn)變相關(guān)疾病19-20
• 前言20-21
• 試驗(yàn)部分21-52
• 1 材料與方法21-23
• 1.1 試驗(yàn)動(dòng)物21
• 1.2 復(fù)方中藥的制備21
• 1.3 主要試劑21
• 1.4 試劑配制21-22
• 1.5 生物試劑盒22
• 1.6 試驗(yàn)儀器22-23
• 2. 試驗(yàn)方法23-30
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及造模23-24
• 2.2 樣品采集24
• 2.3 腹水心臟指數(shù)測(cè)定24
• 2.4 切片制作24-26
• 2.4.1 取材與固定24
• 2.4.2 脫水與透明24-25
• 2.4.3 浸蠟與包埋25
• 2.4.4 切片與貼片25
• 2.4.5 脫蠟染色25-26
• 2.5. 普通PCR檢測(cè)目的基因26-28
• 2.5.1 引物設(shè)計(jì)26
• 2.5.2 Trizol法抽提RNA26-27
• 2.5.3 合成cDN A27-28
• 2.6 熒光定量PCR檢測(cè)目的基因28-29
• 2.7 Elisa測(cè)定目標(biāo)蛋白含量29-30
• 2.7.1 樣品的處理及保存29
• 2.7.2 組織蛋白提取29
• 2.7.3 試劑準(zhǔn)備29
• 2.7.4 測(cè)定目的蛋白步驟29-30
• 2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析30
• 3 結(jié)果30-45
• 3.1 肉雞腹水癥狀和AHI30-31
• 3.2 切片觀察肺血管平滑肌彈性纖維31-36
• 3.2.1 15日齡各組肺動(dòng)脈切片觀察32-33
• 3.2.2 25日齡各組肺動(dòng)脈切片觀察33-34
• 3.2.3 35日齡各組肺動(dòng)脈切片觀察34-35
• 3.2.4 45日齡各組肺動(dòng)脈切片觀察35-36
• 3.3 總RNA提取及常規(guī)RT-PCR檢測(cè)36-43
• 3.3.1 肺血管總RNA提取與檢測(cè)36
• 3.3.2 普通PCR電泳驗(yàn)證目的基因特異性36-37
• 3.3.3 各個(gè)目的基因標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立37-41
• 3.3.4 復(fù)方中藥對(duì)AS肉雞不同日齡各組Myocardin-mRNA表達(dá)量的影響41
• 3.3.5 復(fù)方中藥對(duì)AS肉雞不同日齡各組KLF-4 mRNA表達(dá)量的影響41-42
• 3.3.6 復(fù)方中藥對(duì)AS肉雞不同日齡各組SM22a mRNA的表達(dá)量的影響42-43
• 3.4 AS肉雞不同日齡各組目標(biāo)蛋白表達(dá)量43-45
• 3.4.1 蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線43
• 3.4.2 復(fù)方中藥對(duì)AS肉雞不同日齡各組Myocardin蛋白表達(dá)量的影響43-44
• 3.4.3 復(fù)方中藥對(duì)AS肉雞不同日齡各組KLF-4的蛋白表達(dá)量的影響44-45
• 3.4.4 復(fù)方中藥對(duì)AS肉雞不同日齡各組SM22α的蛋白表達(dá)量的影響45
• 4. 分析與討論45-51
• 4.1 平滑肌表型轉(zhuǎn)化與肉雞腹水綜合征45-47
• 4.1.1 平滑肌表型轉(zhuǎn)化相關(guān)活性因子46-47
• 4.2 Myocardin、KLF-4和SM22α在肉雞腹水綜合征中的表達(dá)47-48
• 4.3 復(fù)方中藥防治肉雞腹水綜合征的機(jī)制分析48-51
• 4.3.1 主要幾味復(fù)方中藥概述48-49
• 4.3.2 復(fù)方中藥活性成分防治肉雞腹水綜合征機(jī)理49-51
• 4.4 精氨酸防治肉雞AS的機(jī)制分析51
• 5. 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-62
• Abstract62-66
• 致謝66

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李建玲,陳玲;肉雞腹水綜合征的診斷與防治[J];中國獸醫(yī)雜志;2000年08期

2 劉祿,覃廣勝,韋平;誘發(fā)肉雞腹水綜合征的因素[J];廣西畜牧獸醫(yī);2000年04期

3 張友新;肉雞腹水綜合征[J];河南畜牧獸醫(yī);2000年02期

4 張小偉,王漢東,王鶴;肉雞腹水綜合征預(yù)防技術(shù)[J];遼寧畜牧獸醫(yī);2000年03期

5 龔大春,楊待建,劉楚漢,程太平,江濤;運(yùn)飲靈對(duì)肉雞腹水綜合征的防治試驗(yàn)[J];湖北農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年03期

6 張力文;“肝寶”治療肉雞腹水綜合征效果好[J];遼寧畜牧獸醫(yī);2001年01期

7 何學(xué)謙;劉利春;黃志秋;張誼;王志杰;;肉雞腹水綜合征的防制[J];西昌農(nóng)業(yè)高等�？茖W(xué)校學(xué)報(bào);2001年02期

8 潘越博;肉雞腹水綜合征的預(yù)防與治療[J];中國家禽;2002年11期

9 張洪增,隗壽延,高君;中草藥健脾除濕方防治肉雞腹水綜合征的效果[J];中國家禽;2002年23期

10 熊革進(jìn);一起肉雞腹水綜合征病例[J];江西畜牧獸醫(yī)雜志;2002年02期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 王娟;何誠;韓博;郝力力;羅伏兵;吳云桃;梁禮成;馬德明;;血管緊張素Ⅱ在肉雞腹水綜合征發(fā)病過程中的動(dòng)態(tài)變化[A];2003全國家畜內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文專輯[C];2003年

2 范春艷;宋金祥;喬健;楊鷹;歐德淵;劉文菊;李靜;高銘宇;;內(nèi)皮素受體拮抗劑預(yù)防肉雞腹水綜合征的研究[A];河北省畜牧獸醫(yī)科技創(chuàng)新論壇論文集[C];2007年

3 董世山;喬健;趙立紅;孫茂紅;張建軍;田勇;;細(xì)胞鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與肉雞腹水綜合征發(fā)生發(fā)展的關(guān)系[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分第12次暨中國動(dòng)物病理生理學(xué)專業(yè)委員會(huì)第11次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2003年

4 張建軍;喬健;孫茂紅;董世山;歐德淵;楊鷹;;鈣拮抗劑對(duì)低溫誘發(fā)肉雞腹水綜合征患雞肺血管重塑的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分第12次暨中國動(dòng)物病理生理學(xué)專業(yè)委員會(huì)第11次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2003年

5 劉燕;劉雙;李佳;韋偉;杜占宇;;肉雞腹水綜合征的綜合診斷[A];“創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)、生態(tài)養(yǎng)殖、轉(zhuǎn)型發(fā)展”論文集[C];2014年

6 向瑞平;石冬梅;沈永恕;李德印;張華;皇甫和平;;VC對(duì)肉雞腹水綜合征發(fā)病率和肺微細(xì)動(dòng)脈肌型化作用的研究[A];河南省畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)第七屆理事會(huì)第二次會(huì)議暨2008年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 定陶縣畜牧服務(wù)中心 高玲;防治肉雞腹水綜合征[N];山東科技報(bào);2012年

2 王小龍;肉雞腹水綜合征的防治[N];河南科技報(bào);2005年

3 劉茍;肉雞腹水綜合征的防治[N];東方城鄉(xiāng)報(bào);2007年

4 承德市承德縣農(nóng)牧局動(dòng)物防疫站 任貴福邋王占英 任麗艷;肉雞腹水綜合征咋防治[N];河北農(nóng)民報(bào);2007年

5 薛玉華;肉雞腹水綜合征的防治[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2009年

6 世亨公司技術(shù)經(jīng)理 馮芳;肉雞腹水綜合征及雞腫頭綜合征的防治[N];河北農(nóng)民報(bào);2009年

7 盧成合;肉雞腹水綜合征的防治[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2007年

8 陶興斌;肉雞腹水綜合征的防治措施[N];中國畜牧獸醫(yī)報(bào);2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 董世山;細(xì)胞鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與肉雞腹水綜合征發(fā)生發(fā)展的關(guān)系[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

2 曾秋鳳;肉雞腹水綜合征的營養(yǎng)調(diào)控及其機(jī)理研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

3 施壽榮;肉雞腹水綜合征的代謝組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 高銘宇;肺動(dòng)脈高壓在高鹽負(fù)荷所致肉雞腹水綜合征中作用及機(jī)制[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

5 董曉芳;肺小動(dòng)脈壁c-jun表達(dá)和SMC表型轉(zhuǎn)化在肉雞腹水綜合征發(fā)生過程中的作用[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張松武;東�？h肉雞腹水綜合征發(fā)病情況調(diào)查與防治效果觀察[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

2 韓麗娟;肉雞腹水綜合征（AS）中MIF與AMPK表達(dá)關(guān)系的研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 鄧廣付;肉雞腹水綜合征的gallus轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析及丹參酮ⅡA對(duì)其防治的研究[D];江西農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 楊革玲;蛋氨酸羥基類似物對(duì)低溫誘導(dǎo)肉雞腹水綜合征的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 楊夏;低溫誘發(fā)肉雞腹水綜合征的分子機(jī)制及VC的緩解作用[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 曹林;維生素C緩解肉雞腹水綜合征的機(jī)理研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

7 王俊武;復(fù)方中藥對(duì)肉雞腹水綜合征肺動(dòng)脈血管平滑肌表型轉(zhuǎn)化活性因子的作用[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

8 李建喜;肉雞腹水綜合征發(fā)病學(xué)的氧應(yīng)激機(jī)制及其防治[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2001年

9 程佳;三種中藥口服液對(duì)低溫導(dǎo)致的肉雞腹水綜合征預(yù)防效果的研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

10 劉守振;缺氧誘導(dǎo)因子-1α與肉雞腹水綜合征關(guān)系的初步研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

，

本文編號(hào)：612515