本文關(guān)鍵詞：雞β-防御素2在大腸桿菌中的串聯(lián)表達(dá)及抗菌活性分析

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【摘要】：利用基因串聯(lián)技術(shù)表達(dá)雞β-防御素2(AvBD2)重組蛋白,分析其生物結(jié)構(gòu)活性以及蛋白表達(dá)量變化。構(gòu)建了重組串聯(lián)表達(dá)載體p ET-28a-AvBD2op-AvBD2,并將其轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白,經(jīng)鎳柱純化后進(jìn)行Western-blot檢測、Tricine-SDS-PAGE分析和MALDI-TOF-MS質(zhì)譜分析。結(jié)果顯示,單表達(dá)工程菌和串聯(lián)表達(dá)工程菌均在9500 u處有特異性條帶;采用BCA法測得的單、串聯(lián)表達(dá)工程菌純化后的蛋白質(zhì)量濃度分別為0.258和0.769 mg/m L;通過凝膠成像系統(tǒng)分析,單表達(dá)工程菌中目標(biāo)蛋白的表達(dá)量約占上清總蛋白的10.3%,而串聯(lián)表達(dá)的約占上清總蛋白的18.3%;MALDI-TOF-MS質(zhì)譜分析結(jié)果表明,單、串聯(lián)表達(dá)蛋白產(chǎn)物的分子質(zhì)量分別為4 300、7 811 u;瓊脂孔穴擴(kuò)散抑菌法檢測證明純化蛋白對多種微生物具有不同的抗菌活性。
【作者單位】： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶與食品科技學(xué)院;安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)院;安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 雞β-防御素(AvBD) 串聯(lián)表達(dá) 抑菌活性 質(zhì)譜分析
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863)項目(2006AA10Z320) 安徽省自主創(chuàng)新專項(13Z03090)
【分類號】：S852.2
【正文快照】： (a.College of Tea and Food Science and Technology;b.College of Life Sciences;c.College of Animal Science andTechnology,Anhui Agricultural University,Hefei 230036,China)防御素(defensin)是一類廣泛存在于生物體內(nèi)富含半胱氨酸的陽離子抗菌肽[1]。根據(jù)半胱氨酸殘

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張輝華,畢英佐,曹永長,馬靜云,陳曉春;雞β-防御素基因的克隆與結(jié)構(gòu)分析[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報;2005年04期

2 齊珂珂;康相濤;陳麗穎;;雞β-防御素的研究及其應(yīng)用前景[J];飼料工業(yè);2005年24期

3 齊珂珂;康相濤;陳麗穎;;雞β-防御素及其應(yīng)用前景[J];廣東農(nóng)業(yè)科學(xué);2005年06期

4 張偉;朱連勤;趙風(fēng)立;龍芳羽;;β-防御素研究進(jìn)展[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2006年05期

5 齊珂珂;康相濤;陳麗穎;;雞β-防御素及其應(yīng)用前景[J];飼料與畜牧;2007年02期

6 趙風(fēng)立;朱連勤;喬彥良;;β-防御素的研究進(jìn)展[J];飼料工業(yè);2007年10期

7 馬得瑩;韓宗璽;廖文燕;劉勝旺;;禽β-防御素的研究進(jìn)展[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報;2007年02期

8 唐博;曹貴方;錫林高娃;任秀娟;;雌性駱駝生殖組織β-防御素-1基因的克隆及其組織表達(dá)量的檢測[J];中國獸醫(yī)科學(xué);2007年06期

9 江龍海;祁克宗;;雞β-防御素研究進(jìn)展[J];家禽科學(xué);2007年07期

10 王猛;馬艷平;劉永生;張杰;;β-防御素研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年08期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳金永;齊莎日娜;張克英;余冰;陳代文;;維生素A誘導(dǎo)小腸上皮β-防御素的基因與蛋白的表達(dá)[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2009學(xué)術(shù)年會論文集（下冊）[C];2009年

2 王瑞琴;藺麗娟;周財源;韓宗璽;邵昱昊;劉勝旺;馬得瑩;;鵪鶉β-防御素9重組蛋白的原核表達(dá)及其生物學(xué)特性的初步研究[A];第六次全國飼料營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

3 楊小梅;張輝華;謝青梅;馬靜云;畢英佐;;鴨β-防御素全長基因的克隆[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會禽病學(xué)分會第十四次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

4 馬得瑩;;重組雞β-防御素5-β-防御素10雙分子蛋白的構(gòu)建及其理化特性的初步分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物營養(yǎng)學(xué)分會第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

5 藺麗娟;王瑞琴;周財源;韓宗璽;邵昱昊;劉勝旺;馬得瑩;;鵪鶉β-防御素10基因的克隆及其生物學(xué)作用的初步研究[A];第六次全國飼料營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

6 曹艷萍;馬清泉;單安山;;雞β-防御素-6及其線性肽在畢赤酵母中的表達(dá)及生物學(xué)活性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物營養(yǎng)學(xué)分會第十一次全國動物營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

7 李子瑞;邵昱昊;韓宗璽;劉曉麗;劉勝旺;馬得瑩;;鴨β-防御素9單克隆抗體的制備和鑒定[A];第六次全國飼料營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

8 桂平;;β-防御素-3在耐甲氧西林金黃色葡萄球菌呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎大鼠肺組織中的表達(dá)[A];中國病理生理學(xué)會危重病醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會第八屆全國大會暨中華呼吸病學(xué)會呼吸生理和重癥監(jiān)護(hù)學(xué)組年會論文集[C];2008年

9 張名岳;張可心;韓宗璽;邵昱昊;劉勝旺;馬得瑩;;3個新的鵝β-防御素的分離、鑒定及其抗菌機(jī)制的初探[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物營養(yǎng)學(xué)分會第十一次全國動物營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

10 張可心;藺麗娟;韓宗璽;邵昱昊;劉勝旺;馬得瑩;;5個新的鴨β-防御素的分離、鑒定及其抗病毒機(jī)制的初探[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物營養(yǎng)學(xué)分會第十一次全國動物營養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 彭力;重組人β-防御素的表達(dá)策略研究[D];浙江大學(xué);2004年

2 王曉芳;中國人乳和牛乳防御素含量特征及功能研究[D];上海交通大學(xué);2014年

3 楊銀鳳;駱駝β-防御素-1（caBD-1）的分子克隆和組織表達(dá)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2004年

4 趙鵬偉;蒙古綿羊β-防御素-1的表達(dá)、純化及生物學(xué)功能研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

5 李琦;脂多糖誘導(dǎo)綿羊輸卵管上皮細(xì)胞β-防御素-1(SBD-1)表達(dá)及其機(jī)制研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

6 王國興;雙歧桿菌胞壁蛋白誘導(dǎo)人腸腺上皮細(xì)胞β-防御素-2基因表達(dá)及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[D];四川大學(xué);2005年

7 唐博;蒙古綿羊雌性生殖道β-防御素（sBD-1）表達(dá)的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

8 胡瓊潔;β-防御素-2，AHL內(nèi)酯酶對肺部銅綠假單胞菌感染的干預(yù)研究[D];華中科技大學(xué);2010年

9 黃磊;重組大腸桿菌高效生產(chǎn)具生物活性的人β-防御素和牛腸激酶的研究[D];浙江大學(xué);2006年

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1 鞏翠潔;β-防御素2在急性肝損傷大鼠小腸中表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張吉穎;雞β防御素重組乳酸菌的制備及免疫保護(hù)效果研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 楊治聰;禽β-防御素6(AvBD6)組織定位及抗J亞群禽白血病病毒活性研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 辛勝男;2個新的鴿β-防御素5的克隆與生物學(xué)特性的初步研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 王t，

本文編號：591922