豬瘟病毒RT-LAMP-LFD檢測方法的建立與應(yīng)用
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【摘要】:【目的】建立一種新型的、能在基層場地進行實時便捷診斷的豬瘟病毒檢測方法。【方法】環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)-橫向流動試紙條技術(shù)(Lateral flow dipstick,LFD)相結(jié)合,針對豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)NS5B基因設(shè)計一套特異性引物及生物素標記探針,結(jié)合異硫氰酸熒光素標記的擴增產(chǎn)物,建立RT-LAMP-LFD檢測方法!窘Y(jié)果】所建立的方法能夠特異地檢測出CSFV的存在,檢測PRRSV、JEV、PCV-2等其他病毒均為陰性;所建立的CSFV-RT-LAMP方法對RNA的最低檢測限為50 pg;反應(yīng)快速,整個擴增反應(yīng)可在1 h內(nèi)完成;操作簡單,不需要PCR儀等復(fù)雜的儀器,結(jié)果可經(jīng)肉眼觀察!窘Y(jié)論】應(yīng)用RTLAMP-LFD檢測CSFV特異性強、靈敏度高,并且操作安全、簡便、快捷,可以滿足基層檢疫的需要。
【作者單位】: 華南農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)學院;
【關(guān)鍵詞】: 豬瘟病毒 NSB基因 環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù) 橫向流動試紙條技術(shù) 病毒檢測
【基金】:國家自然科學基金(U1405216;31172321和31472200) 廣東省高等教育科技創(chuàng)新特殊項目(2012CXZD0013)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 優(yōu)先出版網(wǎng)址:http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.s.20151207.1115.002.html豬瘟(Classical swine fever,CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的豬的一種高度接觸性、急性傳染病。該病的高發(fā)病率和高死亡率給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失,嚴重危害畜
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,本文編號:526005
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