本文關(guān)鍵詞：5株貓杯狀病毒致病性及免疫原性的比較研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：貓杯狀病毒(Feline calicivirus,FCV)是杯狀病毒科(Caliciviridae)杯狀病毒屬(Vesivirus)的重要成員之一,可引起貓及貓科動(dòng)物呼吸道傳染病,其主要臨床癥狀表現(xiàn)為鼻炎、結(jié)膜炎、急性口腔潰瘍、肺炎、慢性胃炎和跛行等。目前的研究發(fā)現(xiàn)FCV只有一個(gè)血清型,且在毒力、抗原性和遺傳性方面變化很大。自1957年Fastier首次分離鑒定FCV以來(lái),在歐洲、美洲、亞洲均發(fā)現(xiàn)FCV,且已呈世界性分布。貓被認(rèn)為是該病毒的自然宿主,幾乎所有貓科動(dòng)物對(duì)FCV易感,其中以貓和獵豹最為易感,同時(shí)也有狗感染的報(bào)道。貓杯狀病毒僅有一個(gè)血清型,但具有豐富的抗原多樣性,遺傳變異性也很強(qiáng),這成為貓杯狀病毒感染準(zhǔn)確診斷和有效防制的一大難題。近年來(lái),由于FCV高度的變異性產(chǎn)生的強(qiáng)毒株可引起嚴(yán)重、急性、致死性全身性疾病(Virulent Systemic Disease,VSD),對(duì)貓群及其他貓科動(dòng)物的健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。FCV的感染可以被免疫反應(yīng)所抑制。通過(guò)人工免疫和使動(dòng)物產(chǎn)生母源抗體都可以一定程度減輕或消除FCV感染后的臨床癥狀。因此,疫苗接種仍是預(yù)防該病的主要措施。FCV疫苗己應(yīng)用多年,主要為滅活苗和減毒活疫苗,且以聯(lián)苗和多價(jià)苗較為常見(jiàn)。傳統(tǒng)疫苗的使用有效地降低了該病的發(fā)病率及動(dòng)物排毒情況。由于FCV豐富的抗原多樣性和遺傳變異性,現(xiàn)有的商品化疫苗并不能提供完全保護(hù)。國(guó)內(nèi)針對(duì)FCV的病原學(xué)、形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)等方面的研究已取得很大進(jìn)展,但對(duì)FCV不同分離株致病性和免疫原性方面的研究還不夠深入。對(duì)FCV致病性和免疫原性的研究有助于毒種的篩選及新型疫苗的研發(fā),可為該病的防制奠定基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)將6~11周齡健康非免疫貓分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,其中,實(shí)驗(yàn)組貓分別人工接種實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的5株已知不同地域的FCV分離株CH-SH株、CH-JL-1株、CH-JL-2株、CH-JL-3株、CH-JL-4株細(xì)胞病毒液,對(duì)照組接種等量細(xì)胞培養(yǎng)液。接種前后分別測(cè)定各組貓的體溫、體重,觀察發(fā)病情況及臨床癥狀,按照歐洲藥典對(duì)癥狀的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行計(jì)分。于感染后14天麻醉處死,觀察組織器官的病理變化并制備病理組織切片。結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組貓感染FCV后總發(fā)病率為100%;SH、JL-1、JL-2;JL-2、JL-3、JL-4組臨床癥狀平均得分分別為8、4、9;10、5、8,對(duì)照組得分為1;病理解剖觀察發(fā)現(xiàn),貓感染FCV后,以鼻、眼分泌物增加,口腔潰瘍?yōu)樘卣?消化道病變較輕微,肺部出現(xiàn)不同程度的變性、出血,呈現(xiàn)明顯的病理性“肉樣變”;病理組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),肺臟有數(shù)量不等的肺泡上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞脫落,伴隨少量纖維蛋白滲出和彌漫性肺泡損傷。由此說(shuō)明,FCV各分離株均有一定的致病性,其中以JL-2株的毒力最強(qiáng),JL-4株次之。將甲醛滅活后的FCV各分離株與弗氏佐劑混合,分別制備油乳劑疫苗。將健康非免疫貓隨機(jī)分為免疫組和對(duì)照組。免疫組皮下接種1.5mL相應(yīng)滅活疫苗,對(duì)照組皮下接種等量F81細(xì)胞培養(yǎng)液。于接種后不同時(shí)間點(diǎn)采集貓血清,應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)免疫貓IgG抗體、IL-2、IL-4和IFN-γ等細(xì)胞因子含量,評(píng)價(jià)各株誘導(dǎo)的體液免疫水平;通過(guò)淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),評(píng)價(jià)各株誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫水平。結(jié)果表明,各株均能誘導(dǎo)試驗(yàn)貓產(chǎn)生免疫應(yīng)答,其誘導(dǎo)體液免疫順序依次為:JL-2JL-1JL-4JL-3SH,誘導(dǎo)細(xì)胞免疫順序依次為:JL-4JL-2JL-1SHJL-3,確定各分離株免疫原性順序?yàn)?JL-2JL-4JL-1JL-3SH。
【關(guān)鍵詞】：貓杯狀病毒 分離株 疫苗 致病性 免疫原性
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S852.65
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 前言9-10
• 第一篇 文獻(xiàn)綜述10-19
• 1 病原學(xué)10-13
• 2 流行病學(xué)13-14
• 3 臨床癥狀與病理剖檢特點(diǎn)14
• 4 診斷14-16
• 5 免疫防制16-17
• 6 研究目的和意義17-19
• 第二篇 研究?jī)?nèi)容19-43
• 第一章 5株貓杯狀病毒致病性的比較19-33
• 1 材料19-22
• 2 方法22-24
• 2.1 FCV陰性貓的篩選22
• 2.2 目的基因的PCR擴(kuò)增22-23
• 2.3 FCV人工接種試驗(yàn)23-24
• 2.4 病理組織切片觀察24
• 2.5 接種貓咽拭子檢測(cè)24
• 2.6 數(shù)據(jù)處理24
• 3 結(jié)果24-31
• 3.1 FCV檢測(cè)及分組結(jié)果24-26
• 3.2 FCV人工接種試驗(yàn)結(jié)果26-31
• 4 討論31-32
• 4.1 FCV的致病特點(diǎn)31-32
• 4.2 試驗(yàn)中遇到的問(wèn)題32
• 5 小結(jié)32-33
• 第二章 5株貓杯狀病毒免疫原性的比較33-43
• 1 材料33-35
• 2 方法35-36
• 2.1 FCV陰性貓的篩選35
• 2.2 油乳劑滅活疫苗的制備35
• 2.3 動(dòng)物接種35
• 2.4 IgG抗體測(cè)定35
• 2.5 IL-2、IL-4、IFN-γ 含量測(cè)定35
• 2.6 T淋巴細(xì)胞增殖測(cè)定35-36
• 2.7 中和試驗(yàn)36
• 2.8 數(shù)據(jù)處理36
• 3 結(jié)果36-40
• 3.1 FCV檢測(cè)及分組結(jié)果36
• 3.2 免疫前后IgG含量變化36-37
• 3.3 免疫前后IL-2 含量變化37-38
• 3.4 免疫前后IL-4 含量變化38
• 3.5 免疫前后IFN-γ 含量變化38-39
• 3.6 免疫前后淋巴細(xì)胞增殖變化39-40
• 3.7 中和試驗(yàn)結(jié)果40
• 4 討論40-42
• 4.1 IL-2、IL-4、IFN-γ 的生物學(xué)特性40-41
• 4.2 細(xì)胞因子的分泌特點(diǎn)41
• 4.3 5 株FCV免疫原性的比較41-42
• 5 小結(jié)42-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 作者簡(jiǎn)介49-50
• 致謝50

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：510275