本文關(guān)鍵詞：PEDV、TGEV和PRoV多重RT-PCR檢測方法的建立及應(yīng)用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為建立豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)及豬輪狀病毒(PRoV)的快速鑒別檢測方法,本試驗(yàn)針對PEDV、TGEV、PRoV的基因組序列設(shè)計(jì)3對特異性引物PEDV-N、TGEV-M和PRoV-VP6,分別擴(kuò)增PEDV N基因、TGEV M基因和PRoV VP6基因。經(jīng)優(yōu)化反應(yīng)條件,成功建立了能同時檢測并區(qū)分PEDV、TGEV、PRoV的多重RT-PCR方法。該方法可特異擴(kuò)增PEDV、TGEV、PRoV相應(yīng)的基因片段,而與豬瘟病毒(CSFV)、豬口蹄疫病毒(FMDV)、豬偽狂犬病病毒(PRV)、豬細(xì)小病毒(PPV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)均無交叉反應(yīng);對PEDV、TGEV、PRoV基因重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的檢出限分別為1.41×103、1.41×102和1.41×103拷貝/μL;在相同條件下重復(fù)試驗(yàn)可獲得一致的結(jié)果。應(yīng)用該方法對臨床采集的190份腹瀉病料進(jìn)行檢測,結(jié)果PEDV陽性42份,陽性率22.11%;TGEV陽性58份,陽性率30.53%;PRoV陽性34份,陽性率17.89%,且存在不同病毒混合感染的現(xiàn)象。結(jié)果表明,所建立的多重RT-PCR方法具有特異性強(qiáng)、敏感性高、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn),可用于PEDV、TGEV和PRoV的臨床檢測和流行病學(xué)調(diào)查。
【作者單位】： 廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;廣西動物疫病預(yù)防控制中心;
【關(guān)鍵詞】： 豬流行性腹瀉病毒 豬傳染性胃腸炎病毒 豬輪狀病毒 多重RT-PCR 檢測方法
【基金】：廣西水產(chǎn)畜牧科技項(xiàng)目(桂漁牧科201528017)
【分類號】：S858.28
【正文快照】： 豬流行性腹瀉(porcine epidemic diarrhea,PED)是由豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic di-arrhea virus,PEDV)引起豬的一種急性、高度傳播性的腸道疾病,以急性腸炎、水樣腹瀉、嘔吐和嚴(yán)重脫水為主要特征。各年齡豬均易感,尤其是哺乳仔豬,發(fā)病率可達(dá)100%,死亡率可達(dá)80%~100%。

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：501757