營養(yǎng)、大腸桿菌和氨基酸對豬小腸上皮細胞抗菌肽和信號通路蛋白表達的影響
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【摘要】:為了研究應激和氨基酸對上皮抗菌肽表達的作用和分子機制,試驗選用豬小腸上皮細胞系IPEC-J2作為研究對象,饑餓和大腸桿菌感染分別作為營養(yǎng)應激和細菌應激,丙氨酸和異亮氨酸作為氨基酸處理,收集細胞mRNA,利用熒光定量PCR測定β防御素和相關(guān)信號通路蛋白表達水平。結(jié)果表明:與對照組(DMEM/F12培養(yǎng)基)相比,饑餓顯著降低了小腸上皮細胞豬防御素2(p BD-2)、豬防御素3(p BD-3)和豬防御素EP2c(p EP2c)及沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源蛋白1(Sirt1)、叉頭轉(zhuǎn)錄因子1(Fox O1)和叉頭轉(zhuǎn)錄因子4(Fox O4)的表達(P0.05),大腸桿菌對β防御素表達無顯著影響(P0.05)。與對照組(饑餓培養(yǎng)基)相比,丙氨酸處理未顯著影響p BD-2和p BD-3的表達(P0.05),但顯著提高了p EP2c表達水平(P0.05);異亮氨酸處理使p BD-2、p BD-3和p EP2c表達水平顯著升高(P0.05)。與對照組相比,丙氨酸和異亮氨酸處理不同程度影響信號通路蛋白轉(zhuǎn)錄,丙氨酸處理顯著提高了Sirt1和Fox O4的表達水平(P0.05),異亮氨酸處理顯著促進了Sirt1、Fox O1和Fox O4的表達(P0.05)。由此得出,營養(yǎng)應激降低豬小腸上皮細胞中β防御素的表達,而氨基酸的補充可促進其表達,該調(diào)控作用可能與Sirt1和叉頭轉(zhuǎn)錄因子(Fox O)信號通路蛋白有關(guān)。
【作者單位】: 安徽科技學院動物科學學院;中國農(nóng)業(yè)大學動物科學學院;
【關(guān)鍵詞】: 豬小腸上皮細胞 抗菌肽 防御素 信號通路 Sirt Fox O
【基金】:國家自然科學基金(31501968) 安徽省高校自然科學研究項目(KJ2015A296) 安徽省自然科學基金(1608085QC72) 安徽科技學院高層次人才引進項目(ZRC2014453)
【分類號】:S828
【正文快照】: 抗生素在畜禽生產(chǎn)中的應用歷史超過50年之久,主要用于減少畜禽發(fā)病率、提高生產(chǎn)速度和飼料利用率,然而,濫用抗生素引發(fā)眾多人畜病原菌產(chǎn)生耐藥性,直接危害全球公共健康[1]。研究表明,短期使用低劑量抗生素會造成豬腸道內(nèi)微生物耐藥性基因的數(shù)量和多樣性增加[2]。研究開發(fā)提高
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