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營養(yǎng)、大腸桿菌和氨基酸對豬小腸上皮細(xì)胞抗菌肽和信號通路蛋白表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-06-29 08:09

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【摘要】:為了研究應(yīng)激和氨基酸對上皮抗菌肽表達(dá)的作用和分子機(jī)制,試驗(yàn)選用豬小腸上皮細(xì)胞系IPEC-J2作為研究對象,饑餓和大腸桿菌感染分別作為營養(yǎng)應(yīng)激和細(xì)菌應(yīng)激,丙氨酸和異亮氨酸作為氨基酸處理,收集細(xì)胞mRNA,利用熒光定量PCR測定β防御素和相關(guān)信號通路蛋白表達(dá)水平。結(jié)果表明:與對照組(DMEM/F12培養(yǎng)基)相比,饑餓顯著降低了小腸上皮細(xì)胞豬防御素2(p BD-2)、豬防御素3(p BD-3)和豬防御素EP2c(p EP2c)及沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源蛋白1(Sirt1)、叉頭轉(zhuǎn)錄因子1(Fox O1)和叉頭轉(zhuǎn)錄因子4(Fox O4)的表達(dá)(P0.05),大腸桿菌對β防御素表達(dá)無顯著影響(P0.05)。與對照組(饑餓培養(yǎng)基)相比,丙氨酸處理未顯著影響p BD-2和p BD-3的表達(dá)(P0.05),但顯著提高了p EP2c表達(dá)水平(P0.05);異亮氨酸處理使p BD-2、p BD-3和p EP2c表達(dá)水平顯著升高(P0.05)。與對照組相比,丙氨酸和異亮氨酸處理不同程度影響信號通路蛋白轉(zhuǎn)錄,丙氨酸處理顯著提高了Sirt1和Fox O4的表達(dá)水平(P0.05),異亮氨酸處理顯著促進(jìn)了Sirt1、Fox O1和Fox O4的表達(dá)(P0.05)。由此得出,營養(yǎng)應(yīng)激降低豬小腸上皮細(xì)胞中β防御素的表達(dá),而氨基酸的補(bǔ)充可促進(jìn)其表達(dá),該調(diào)控作用可能與Sirt1和叉頭轉(zhuǎn)錄因子(Fox O)信號通路蛋白有關(guān)。
【作者單位】: 安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】豬小腸上皮細(xì)胞 抗菌肽 防御素 信號通路 Sirt Fox O
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31501968) 安徽省高校自然科學(xué)研究項(xiàng)目(KJ2015A296) 安徽省自然科學(xué)基金(1608085QC72) 安徽科技學(xué)院高層次人才引進(jìn)項(xiàng)目(ZRC2014453)
【分類號】:S828
【正文快照】: 抗生素在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用歷史超過50年之久,主要用于減少畜禽發(fā)病率、提高生產(chǎn)速度和飼料利用率,然而,濫用抗生素引發(fā)眾多人畜病原菌產(chǎn)生耐藥性,直接危害全球公共健康[1]。研究表明,短期使用低劑量抗生素會造成豬腸道內(nèi)微生物耐藥性基因的數(shù)量和多樣性增加[2]。研究開發(fā)提高

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本文編號:497131

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