新型鴨細小病毒VP3基因的原核表達及多克隆抗體的制備
本文關鍵詞:新型鴨細小病毒VP3基因的原核表達及多克隆抗體的制備,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:應用PCR方法擴增了新型鴨細小病毒(novel duck parvovirus,NDPV)的VP3基因,然后將其克隆到原核表達載體p GEX-4T-1中,獲得重組質粒p GEX-VP3。將p GEX-VP3轉化BL21感受態(tài)細胞后,用1.0mmol/L IPTG于37℃進行誘導。最后,分別用SDS-PAGE和Western-blot對表達產物進行分析和鑒定。結果,NDPV VP3蛋白在大腸桿菌細胞中成功獲得表達,表達產物主要以包涵體形式存在,分子質量為84 ku。將純化的重組VP3蛋白免疫實驗家兔,制備多克隆抗體。Western-blot檢測結果表明,該抗體能同時與重組的NDPV VP3蛋白及自然感染的NDPV發(fā)生反應,說明制備的抗體具有良好的抗原反應性。這些結果為進一步建立NDPV檢測方法和研發(fā)新型疫苗研究奠定了物質基礎。
【作者單位】: 甘肅農業(yè)大學動物醫(yī)學院;中國農業(yè)科學院上海獸醫(yī)研究所;安徽農業(yè)大學動物科技學院;西北農林科技大學動物醫(yī)學院;
【關鍵詞】: 新型鴨細小病毒 VP基因 原核表達 多克隆抗體
【基金】:上海市科委科技創(chuàng)新醫(yī)藥與農業(yè)領域項目(13391901602) 國家自然科學基金(31502068;No.31270194) 農業(yè)部公益性行業(yè)科研專項(201303046) 上海市閔行區(qū)高層次人才隊伍建設專項資金
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 2014年下半年以來,在我國山東、安徽、江蘇等地鴨群中大面積爆發(fā)了一種以鴨喙畸形、萎縮變短,舌頭腫大外垂,兩腿無力、行走困難,生長發(fā)育障礙等為主要癥狀的傳染病,俗稱“鴨短喙—侏儒綜合征”或“鴨大舌病”。經鑒定該病病原為一種新型鴨細小病毒(novel duck parvovirus,NDPV
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本文關鍵詞:新型鴨細小病毒VP3基因的原核表達及多克隆抗體的制備,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:492737
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