本文關(guān)鍵詞：新型鴨細(xì)小病毒VP3基因的原核表達(dá)及多克隆抗體的制備，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：應(yīng)用PCR方法擴(kuò)增了新型鴨細(xì)小病毒(novel duck parvovirus,NDPV)的VP3基因,然后將其克隆到原核表達(dá)載體p GEX-4T-1中,獲得重組質(zhì)粒p GEX-VP3。將p GEX-VP3轉(zhuǎn)化BL21感受態(tài)細(xì)胞后,用1.0mmol/L IPTG于37℃進(jìn)行誘導(dǎo)。最后,分別用SDS-PAGE和Western-blot對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行分析和鑒定。結(jié)果,NDPV VP3蛋白在大腸桿菌細(xì)胞中成功獲得表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物主要以包涵體形式存在,分子質(zhì)量為84 ku。將純化的重組VP3蛋白免疫實(shí)驗(yàn)家兔,制備多克隆抗體。Western-blot檢測(cè)結(jié)果表明,該抗體能同時(shí)與重組的NDPV VP3蛋白及自然感染的NDPV發(fā)生反應(yīng),說(shuō)明制備的抗體具有良好的抗原反應(yīng)性。這些結(jié)果為進(jìn)一步建立NDPV檢測(cè)方法和研發(fā)新型疫苗研究奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 新型鴨細(xì)小病毒 VP基因 原核表達(dá) 多克隆抗體
【基金】：上海市科委科技創(chuàng)新醫(yī)藥與農(nóng)業(yè)領(lǐng)域項(xiàng)目(13391901602) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31502068;No.31270194) 農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201303046) 上海市閔行區(qū)高層次人才隊(duì)伍建設(shè)專項(xiàng)資金
【分類號(hào)】：S852.65
【正文快照】： 2014年下半年以來(lái),在我國(guó)山東、安徽、江蘇等地鴨群中大面積爆發(fā)了一種以鴨喙畸形、萎縮變短,舌頭腫大外垂,兩腿無(wú)力、行走困難,生長(zhǎng)發(fā)育障礙等為主要癥狀的傳染病,俗稱“鴨短喙—侏儒綜合征”或“鴨大舌病”。經(jīng)鑒定該病病原為一種新型鴨細(xì)小病毒(novel duck parvovirus,NDPV

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：492737