絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺增齡性變化的影響
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【摘要】:本研究通過在飼料中添加0.5%的絞股藍(lán)粉末,采用HE、改良甲苯胺藍(lán)及免疫組織化學(xué)等染色方法,在光學(xué)顯微鏡下觀察1-150日齡間,絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺重量和指數(shù)、皮髓面積比、胸腺小體的數(shù)量和面積、肥大細(xì)胞的數(shù)量以及Ghrelin陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量和平均光密度的影響,從組織學(xué)的角度探討絞股藍(lán)對(duì)胸腺的作用,以期為絞股藍(lán)增強(qiáng)機(jī)體免疫力的進(jìn)一步研究提供一些形態(tài)學(xué)依據(jù),并推動(dòng)絞股藍(lán)的開發(fā)利用。光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)學(xué)研究發(fā)現(xiàn):廣西三黃雞胸腺外包裹有一層被膜,被膜深入胸腺內(nèi)部,將其分成多個(gè)大小不一的胸腺小葉,胸腺小葉外圍的皮質(zhì)部染色較深,中央的髓質(zhì)部染色較淺。在髓質(zhì)部能觀察到三種類型的胸腺小體,即單細(xì)胞型胸腺小體、典型同心圓狀胸腺小體及團(tuán)塊狀胸腺小體。經(jīng)改良甲苯胺藍(lán)染色的肥大細(xì)胞,胞質(zhì)被異染成紫紅色,胞核藍(lán)染,細(xì)胞大小不一,形狀多樣,主要分布于髓質(zhì)部,多圍繞血管、胸腺小體或散在于淋巴細(xì)胞之間,在小葉間隙、胸腺皮質(zhì)和血管中也有少量分布。經(jīng)免疫組化染色后觀察到,Ghrelin陽(yáng)性細(xì)胞主要分布于胸腺皮髓交界處及髓質(zhì)內(nèi),多數(shù)為巨噬細(xì)胞及上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞,有的胸腺小體細(xì)胞也呈現(xiàn)出陽(yáng)性反應(yīng),陽(yáng)性物質(zhì)定位于胞質(zhì)中。統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示:1、隨著日齡的增加,胸腺重量逐漸升高,胸腺指數(shù)整體來(lái)看是先逐漸升高,達(dá)到最大值后開始降低,雖然差異不顯著(P0.05),但絞股藍(lán)在一定程度上能夠提高胸腺重量及胸腺指數(shù)。2、皮髓比逐漸降低,且個(gè)各日齡間差異顯著,在120日齡時(shí),試驗(yàn)組皮髓比顯著大于對(duì)照組(P0.05)。3、對(duì)照組和試驗(yàn)組的胸腺小體數(shù)量分別在56日齡和90日齡前逐漸增多,之后呈波浪式下降,在28日齡及120日齡時(shí),試驗(yàn)組胸腺小體數(shù)量顯著多于對(duì)照組(P0.05),90日齡時(shí),試驗(yàn)組胸腺小體數(shù)量極顯著的大于對(duì)照組(P0.01),56日齡時(shí),對(duì)照組胸腺小體數(shù)量顯著多于試驗(yàn)組(P0.05)。對(duì)照組和試驗(yàn)組的胸腺小體面積在120日齡前逐漸增大,之后開始下降,但在各日齡時(shí)對(duì)照組和試驗(yàn)組間差異不顯著,說明絞股藍(lán)對(duì)胸腺小體的面積沒有顯著影響。4、不同日齡間的肥大細(xì)胞數(shù)量差異明顯,總體來(lái)看,呈逐漸降低的趨勢(shì),提示廣西三黃雞胸腺內(nèi)肥大細(xì)胞的減少可能與性激素和T細(xì)胞的變化相關(guān)。在120日齡時(shí),試驗(yàn)組的肥大細(xì)胞數(shù)量極顯著的大于對(duì)照組(P0.01),150日齡時(shí),試驗(yàn)組的肥大細(xì)胞數(shù)量顯著的大于對(duì)照組(P0.05),在90日齡時(shí),試驗(yàn)組也是多于對(duì)照組的,但差異不顯著(P0.05),說明絞股藍(lán)能夠增強(qiáng)老齡動(dòng)物的免疫功能。5、Ghrelin陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量的變化趨勢(shì)大致表現(xiàn)為先逐漸升高,至120日齡達(dá)到最大值后,開始下降,提示老齡胸腺的萎縮可能與Ghrelin的減少有關(guān)。在90日齡和150日齡時(shí),試驗(yàn)組的陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)顯著多于對(duì)照組(P0.05)。Ghrelin陽(yáng)性細(xì)胞的平均光密度呈波浪狀變化,不同日齡間差異明顯,在90日齡和150日齡時(shí),試驗(yàn)組陽(yáng)性細(xì)胞的平均光密度顯著大于對(duì)照組(P0.05),在14日齡時(shí),試驗(yàn)組也是大于對(duì)照組,56曰齡時(shí),對(duì)照組大于試驗(yàn)組,但差異均不顯著(P0.05)。說明絞股藍(lán)能夠提高老齡胸腺中的Ghrelin含量,有助于延緩胸腺萎縮。6、從以上研究結(jié)果中可以推測(cè)出,在飼料中添加0.5%的絞股藍(lán)粉末能夠促進(jìn)胸腺的早期發(fā)育,改善老齡胸腺的組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞成分,提高胸腺的免疫功能。
【關(guān)鍵詞】:絞股藍(lán) 胸腺 增齡性變化 胸腺小體 肥大細(xì)胞 Ghrelin
【學(xué)位授予單位】:廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S831.5
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-12
- 常用縮寫詞12-13
- 綜述部分13-28
- 第一章 絞股藍(lán)的研究進(jìn)展13-21
- 1.1 絞股藍(lán)概述13
- 1.2 絞股藍(lán)的化學(xué)成分13-16
- 1.2.1 絞股藍(lán)皂苷13-14
- 1.2.2 絞股藍(lán)多糖14-15
- 1.2.3 黃酮類物質(zhì)15
- 1.2.4 其他成分15-16
- 1.3 絞股藍(lán)的藥理學(xué)作用16-19
- 1.3.1 抗腫瘤16-17
- 1.3.2 免疫調(diào)節(jié)作用17
- 1.3.3 降血脂作用17-18
- 1.3.4 對(duì)心血管系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響18
- 1.3.5 抗氧化及抗衰老18-19
- 1.3.6 其他作用19
- 1.4 絞股藍(lán)的毒力研究19
- 1.5 絞股藍(lán)的開發(fā)應(yīng)用19-21
- 第二章 胸腺的研究進(jìn)展21-28
- 2.1 胸腺的研究概況21-24
- 2.1.1 胸腺的解剖學(xué)位置21
- 2.1.2 胸腺增齡性變化的相關(guān)研究21-22
- 2.1.3 胸腺小體的研究現(xiàn)狀22-24
- 2.2 肥大細(xì)胞的研究現(xiàn)狀24-25
- 2.3 Ghrelin的研究現(xiàn)狀25-28
- 實(shí)驗(yàn)部分28-59
- 前言28-29
- 第一章 材料與方法29-34
- 1.1 試驗(yàn)材料29-30
- 1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及分組處理29
- 1.1.2 主要試驗(yàn)藥品與試劑29
- 1.1.3 主要儀器設(shè)備29-30
- 1.1.4 常用試劑的配制(見附錄)30
- 1.2 試驗(yàn)方法30-34
- 1.2.1 動(dòng)物組織樣品取材及固定30
- 1.2.2 石蠟切片的制作30
- 1.2.3 HE染色步驟30
- 1.2.4 MTB染色步驟30-31
- 1.2.5 免疫組織化學(xué)染色步驟31-32
- 1.2.6 圖片采集和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析32-34
- 第二章 結(jié)果與分析34-50
- 2.1 胸腺的解剖學(xué)位置及組織學(xué)結(jié)構(gòu)34
- 2.2 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺重量和指數(shù)的影響34-36
- 2.2.1 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺重量的影響34-35
- 2.2.2 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺指數(shù)的影響35-36
- 2.3 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺皮髓比的影響36-38
- 2.3.1 廣西三黃雞胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)的變化36-37
- 2.3.2 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺皮髓比的影響37-38
- 2.4 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺小體的影響38-41
- 2.4.1 廣西三黃雞胸腺小體的形態(tài)38-39
- 2.4.2 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺小體數(shù)量的影響39-40
- 2.4.3 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺小體面積的影響40-41
- 2.5 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺內(nèi)MC的影響41-45
- 2.5.1 廣西三黃雞胸腺內(nèi)MC的分布41-44
- 2.5.2 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺內(nèi)MC數(shù)量的影響44-45
- 2.6 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺內(nèi)Ghrelin的影響45-50
- 2.6.1 廣西三黃雞胸腺內(nèi)Ghrelin陽(yáng)性細(xì)胞的分布45-47
- 2.6.2 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺內(nèi)Ghrelin陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量的影響47-48
- 2.6.3 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺內(nèi)Ghrelin陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度(MOD)的影響48-50
- 第三章 討論50-58
- 3.1 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺重量及指數(shù)的影響50-51
- 3.2 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺皮髓比的影響51-53
- 3.3 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺小體的影響53-55
- 3.4 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺內(nèi)肥大細(xì)胞的影響55-56
- 3.5 絞股藍(lán)對(duì)廣西三黃雞胸腺內(nèi)Ghrelin的影響56-58
- 第四章 結(jié)論58-59
- 參考文獻(xiàn)59-69
- 附錄69-71
- 致謝71-72
- 碩士在讀期間發(fā)表的論文及參與的科研項(xiàng)目72
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