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產(chǎn)γ-氨基丁酸屎腸球菌的篩選及γ-氨基丁酸的定量

發(fā)布時間:2017-06-24 02:02

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【摘要】:本試驗旨在利用分子生物學方法鑒定分離得到1株產(chǎn)γ-氨基丁酸(GABA)屎腸球菌,并定量測定所產(chǎn)GABA的量。從泡菜、酸奶、土壤、新鮮牛奶樣品中篩選出一目標菌株F6,進行形態(tài)學特征與革蘭氏染色鑒定;再擴增菌株F6的16S r DNA基因,然后測定該基因序列和構建系統(tǒng)發(fā)育樹;同時采用高效液相色譜(HPLC)法定量測定菌株F6發(fā)酵液中的GABA含量。結果表明:菌株F6菌落大而光滑、圓形、直徑1~2 mm、邊緣整齊、乳白色;在分離培養(yǎng)基上菌落周圍形成透明圈,使分離培養(yǎng)基呈黃色;在MRS固體培養(yǎng)基上菌落不透明,周圍有透明圈。革蘭氏染色鑒定菌株F6為陽性菌。分子生物學鑒定分析顯示,菌株F6的16S r DNA基因序列與Gen Bank數(shù)據(jù)庫中屎腸球菌(Enterococcus faecium)的相似性大于99%。HPLC法測定得到GABA標準曲線線性方程為Y=7 080 733.139 5 X-4 511.692 7(R2=0.999 4),通過方程得出菌株F6發(fā)酵液中的GABA含量為7.1 g/L,保留時間為7~10 min。結果提示,本試驗篩選得到1株高產(chǎn)GABA的屎腸球菌F6。
【作者單位】: 安徽農(nóng)業(yè)大學動物科技學院;江蘇優(yōu)仕生物科技發(fā)展有限公司;安徽科技學院動物科學學院;揚州大學動物科學與技術學院;
【關鍵詞】屎腸球菌 γ-氨基丁酸 S r DNA基因序列 高效液相色譜法定量 篩選
【基金】:安徽高校自然科學研究項目計劃(KJ2015A247) 宿遷市農(nóng)業(yè)科技支撐項目(L201405) 宿遷市產(chǎn)業(yè)發(fā)展引導資金項目(M201512)
【分類號】:S816.7
【正文快照】: 乳酸菌具有調(diào)節(jié)機體胃腸道微生態(tài)平衡、有益于畜禽健康、改善畜禽生產(chǎn)性能、減少環(huán)境污染、替代飼用抗生素等重要作用,在動物生產(chǎn)中的應用日益廣泛。然而,乳酸桿菌為厭氧菌,抗逆性差、不耐氧、易失活,應用效果不穩(wěn)定,而球菌較桿菌具有更強的抗逆性,菌株活性損失較低,未來球菌

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1 劉穎斌;唐U

本文編號:476809


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