寒地獺兔腸道菌群定植的初步研究
本文關(guān)鍵詞:寒地獺兔腸道菌群定植的初步研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:獺兔的腸道疾病是危害兔業(yè)養(yǎng)殖的重要因素之一,發(fā)病率非常高,而且不易治愈,給養(yǎng)殖戶造成極大的損失,成為從業(yè)者廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)。極為突出的是斷奶獺兔腸道疾病的出現(xiàn),在飼養(yǎng)管理中通常采用對健康兔提前接種疫苗或添加抗生素來預(yù)防和治療。但伴隨著抗生素的濫用,導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生很強(qiáng)的耐藥性,耐藥菌株的出現(xiàn)在一定程度上也會威脅人類的健康?股靥娲返难兄剖墙鉀Q獺兔腸道疾病的趨向,當(dāng)前微生態(tài)制劑作為主要的抗生素替代品很受養(yǎng)殖戶的歡迎,被廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖環(huán)節(jié),但目前還沒有研發(fā)出專門用在獺兔日糧中的微生態(tài)制劑。本試驗在寒地獺兔腸道菌群定植規(guī)律初步研究的基礎(chǔ)上,研究軟糞液和小腸液對幼兔腸道菌群定植的影響,為獺兔微生態(tài)制劑的研制奠定基礎(chǔ)。試驗一旨在探究相同生活環(huán)境下不同日齡的獺兔腸道菌群定植的規(guī)律,分別對不同日齡健康獺兔腸壁內(nèi)容物中的細(xì)菌提基因組DNA,應(yīng)用Real-time PCR方法對不同日齡的獺兔腸道菌群的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。結(jié)果顯示1d時腸道內(nèi)定植的細(xì)菌總量最少,5和10d時各種細(xì)菌的濃度開始增加,不同細(xì)菌之間有顯著差異(P0.05);20d時濃度迅速增加,定植在十二指腸、空腸和回腸、盲腸內(nèi)濃度最大的細(xì)菌分別為雙歧桿菌、韋榮球菌、梭菌,數(shù)值顯著高于其他菌種(P0.05);30-60d,定植在腸道內(nèi)的梭菌、韋榮球菌、雙歧桿菌和腸球菌濃度顯著高于其他細(xì)菌(P0.05),盲腸內(nèi)的擬桿菌濃度高于小腸;120d時雙歧桿菌、乳酸桿菌濃度略微減小,梭菌以及韋榮球菌保持穩(wěn)定,不同細(xì)菌之間有顯著差異(P0.05)。試驗二為探究軟糞液以及小腸液對獺兔腸道內(nèi)細(xì)菌定植的影響,通過灌喂軟糞凍干液和小腸凍干液,比較獺兔腸道內(nèi)定植的7種細(xì)菌的濃度變化。90只幼兔平均分成三組,分別灌喂軟糞凍干液、小腸凍干液,純凈水為空白對照。在超凈臺下刮取32、46d幼兔腸壁上的內(nèi)容物,提取細(xì)菌的DNA。設(shè)計7種細(xì)菌的特異性引物,利用Real-time PCR方法,定量細(xì)菌的濃度。結(jié)果表明,與空白組相比,灌喂軟糞凍干液32、46d的幼兔,空腸內(nèi)定植的擬桿菌以及雙歧桿菌濃度升高(P0.05),回腸內(nèi)的梭菌、韋榮球菌的濃度升高(P0.01),盲腸內(nèi)定植的雙歧桿菌濃度升高(P0.05)。與空白組相比,灌喂小腸凍干液的32d幼兔其十二指腸以及回腸內(nèi)的梭菌濃度升高(P0.01),雙歧桿菌濃度升高(P0.05);46d幼兔回腸內(nèi)定植的韋榮球菌以及雙歧桿菌的濃度升高(P0.05)。綜上所述:獺兔不同生長階段,定植在腸道不同部位中的細(xì)菌呈現(xiàn)不同的變化規(guī)律,構(gòu)成穩(wěn)定的微生態(tài)平衡系統(tǒng)。軟糞液以及小腸液能提高擬桿菌、梭菌、韋榮球菌、雙歧桿菌在腸道內(nèi)的定植效果。
【關(guān)鍵詞】:獺兔 軟糞液 小腸液 腸道菌群 定植
【學(xué)位授予單位】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S829.1
【目錄】:
- 摘要8-9
- 英文摘要9-11
- 1 引言11-22
- 1.1 獺兔11-14
- 1.1.1 獺兔的外部形態(tài)11
- 1.1.2 獺兔的食性11
- 1.1.3 獺兔的食糞行為11-12
- 1.1.4 獺兔消化系統(tǒng)發(fā)育特點(diǎn)12-13
- 1.1.5 獺兔腹瀉13-14
- 1.2 腸道菌群的研究進(jìn)展14-18
- 1.2.1 腸道菌群的概念14
- 1.2.2 腸道菌群的分類14-16
- 1.2.3 腸道菌群的生理作用16-17
- 1.2.4 腸道菌群失調(diào)17
- 1.2.5 腸道菌群失調(diào)的危害17-18
- 1.3 腸道菌群定植的研究18-20
- 1.3.1 定植的概念18
- 1.3.2 定植抗力18-19
- 1.3.3 定植的條件19
- 1.3.4 影響定植的因素19-20
- 1.4 微生物多樣性分析方法的研究進(jìn)展20-21
- 1.4.1 傳統(tǒng)的研究方法20
- 1.4.2 實時熒光定量PCR技術(shù)20-21
- 1.4.3 變性梯度凝膠電泳技術(shù)21
- 1.5 試驗研究的目標(biāo)及意義21-22
- 2 材料與方法22-27
- 2.1 材料22-24
- 2.1.1 試驗動物22
- 2.1.2 軟糞液和小腸液凍干粉的制備22-23
- 2.1.3 主要試劑23
- 2.1.4 主要儀器23-24
- 2.1.5 引物的設(shè)計與合成24
- 2.2 方法24-27
- 2.2.1 獺兔腸道內(nèi)容物基因組DNA的提取24-25
- 2.2.2 基因組DNA的含量及純度檢測25
- 2.2.3 常規(guī)PCR反應(yīng)25
- 2.2.4 細(xì)菌的定量檢測25-26
- 2.2.5 試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析26-27
- 3 結(jié)果與分析27-38
- 3.1 引物的特異性檢測27
- 3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線27-30
- 3.3 溶解曲線30
- 3.4 腸道內(nèi)容物細(xì)菌的定量檢測30-38
- 3.4.1 不同日齡腸道定植菌群的測定30-33
- 3.4.2 軟糞液和小腸液對腸道菌群定植的影響33-38
- 4 討論38-41
- 4.1 不同日齡寒地獺兔腸道菌群的定植38-39
- 4.2 軟糞液和小腸液對寒地獺兔腸道菌群定植的影響39-40
- 4.3 研究的創(chuàng)新性40
- 4.4 研究中存在的問題和展望40-41
- 5 結(jié)論41-42
- 致謝42-43
- 參考文獻(xiàn)43-50
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文50
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本文編號:460557
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