肉產(chǎn)量和肉品質(zhì)都是家畜肉品生產(chǎn)中重要的經(jīng)濟性狀,同時也成為了近些年研究的重要領(lǐng)域。Akirin1基因作為受到MSTN基因負(fù)調(diào)節(jié)的下游基因,參與動物胚胎發(fā)育、肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖分化和骨骼肌受損修復(fù)等生理過程。因此Akirin1基因可能通過參與調(diào)節(jié)骨骼肌生長發(fā)育成為新的提高家畜肉產(chǎn)量的候選基因。研究表明Akirin2基因的單核苷酸多肽性(SNP)與日本黑牛和韓國本地牛的大理石花紋評分顯著相關(guān),暗示了Akirin2基因可能通過參與調(diào)節(jié)肌肉中的大理石花紋成為新的改善家畜肉品質(zhì)的候選基因。本研究運用RT-PCR結(jié)合克隆測序方法獲得天府肉羊Akirin1基因和Akirin2基因的全編碼區(qū)序列。Akirin1基因序列長480bp包括426bp的開放閱讀框,編碼141個氨基酸,序列提交NCBI得到登錄號：KF515991。Akirin1氨基酸序列含有11個磷酸化位點,系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明天府肉羊Akirin1基因氨基酸序列與牛和綿羊的Akirin1基因氨基酸序列具有較高的相似性。Akirin2基因序列長660bp包括579bp的開放閱讀框,編碼192個氨基酸,序列提交NCBI得到登錄號：KF515992。Ak...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
常用詞語縮寫
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 Akirin基因研究進(jìn)展
        1.1.1 Akirin基因的發(fā)現(xiàn)
        1.1.2 Akirin基因的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 Akirin基因的表達(dá)
        1.1.4 Akirin基因的功能
    1.2 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 試驗動物與樣品采集
        2.1.2 主要儀器設(shè)備
        2.1.3 主要試劑及試劑盒
        2.1.4 主要試劑的配制
    2.2 試驗方法
        2.2.1 組織總RNA的提取
        2.2.2 提取RNA質(zhì)量和濃度檢測
        2.2.3 cDNA合成
        2.2.4 引物設(shè)計
        2.2.5 Akirin1和Akirin2基因cDNA克隆測序
        2.2.6 熒光定量PCR
        2.2.7 蛋白質(zhì)免疫雜交(Western Bloting)
        2.2.8 統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 總RNA檢測
    3.2 Akirin1和Akirin2基因克隆與序列分析
        3.2.1 Akirin1基因RT-PCR結(jié)果
        3.2.2 Akirin1基因克隆產(chǎn)物測序
        3.2.3 Akirinl基因序列比對
        3.2.4 Akirin1進(jìn)化樹的構(gòu)建
        3.2.5 Akirin1蛋白質(zhì)理化性質(zhì)分析
        3.2.6 Akirin2基因RT-PCR結(jié)果
        3.2.7 Akirin2基因克隆產(chǎn)物測序
        3.2.8 Akirin2基因序列比對
        3.2.9 Akirin2進(jìn)化樹的構(gòu)建
        3.2.10 Akirin2蛋白理化性質(zhì)分析
    3.3 Akirinl和Akirin2基因熒光定量PCR結(jié)果
        3.3.1 引物正確性驗證
        3.3.2 熔解曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.3.3 Akirin1和Akirin2基因mRNA表達(dá)情況
    3.4 Akirin1和Akirin2蛋白表達(dá)差異
        3.4.1 Akirin1蛋白表達(dá)差異
        3.4.2 Akirin2蛋白表達(dá)差異
4 討論
    4.1 Akirin1基因生物信息學(xué)分析
        4.1.1 Akirin1基因cDNA序列分析
        4.1.2 Akirin1蛋白序列分析
    4.2 Akirin2基因生物信息學(xué)分析
        4.2.1 Akirin2基因cDNA序列分析
        4.2.2 Akirin2蛋白序列分析
    4.3 Akirin1和Akirin2基因的mRNA表達(dá)分析
        4.3.1 Akirin1基因的mRNA表達(dá)分析
        4.3.2 Akirin2基因的mRNA表達(dá)分析
    4.4 Akirin1和Akirin2蛋白的表達(dá)分析
        4.4.1 Akirin1蛋白表達(dá)
        4.4.2 Akirin2蛋白表達(dá)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文



本文編號：4041435