新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)是副黏病毒科、禽腮腺炎病毒屬的唯一成員,可以導(dǎo)致家禽養(yǎng)殖業(yè)巨大的損失。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(Ubiquitin-proteasome system, UPS)是真核生物中主要的蛋白質(zhì)降解途徑,參與多種細(xì)胞功能調(diào)控。近年來(lái)關(guān)于UPS參與病毒感染各個(gè)過(guò)程的分子機(jī)制逐漸成為研究熱點(diǎn)。為了確定泛素-蛋白酶體系統(tǒng)在NDV感染中的作用,本文開展了一些列試驗(yàn)研究。 一、新城疫病毒對(duì)宿主細(xì)胞泛素化蛋白和26S蛋白酶體活性的影響 本研究使用針對(duì)泛素的抗體以檢測(cè)NDV感染對(duì)DF1和HeLa細(xì)胞內(nèi)泛素化蛋白的影響,發(fā)現(xiàn)NDV對(duì)DF1細(xì)胞內(nèi)泛素化蛋白水平的影響不明顯,但可以使HeLa細(xì)胞內(nèi)泛素化蛋白水平逐漸降低。之后又比較了相同感染條件下,兩種細(xì)胞26S蛋白酶體活性的變化,發(fā)現(xiàn)與正常未感染細(xì)胞中的26S蛋白酶體活性相比,NDV可以引起DF1細(xì)胞內(nèi)26S蛋白酶體三種活性位點(diǎn)活性都升高,在HeLa細(xì)胞中26S蛋白酶體活性升高的程度更加顯著。 二、泛素-蛋白酶體系統(tǒng)相關(guān)抑制劑對(duì)新城疫病毒復(fù)制的影響 本研究首先選取三種蛋白酶體抑制劑MG...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1新城疫病毒感染對(duì)DF-1細(xì)胞中泛素化蛋白水平的影響

有10mol/LMG-132的培養(yǎng)基預(yù)處理細(xì)胞2h后，接種1MOIHerts/33病毒，37℃吸附1h后棄去上清。換上含有抑制劑MG-132的維持培養(yǎng)基，同時(shí)設(shè)置DMSO對(duì)照組。分別在感染后第2、4、6、8、12、24、36和48小時(shí)收集細(xì)胞上清，檢測(cè)上清中病毒TCID50，繪制....

圖3蛋自酶體抑制荊MG132,硼替佐米、乳胞轟和泛轟活化碗抑制荊PYR-01工作濃度的篩選Fig.注Tkeworkingconcentrationofthreekindsofprotea

個(gè)蛋白水解位點(diǎn)活性的影響Fig.2Effectontheactivityof26SproteasomeinDF-1cellswithNDVinfection1：DF-1細(xì)胞組；2：DF-1+Herts/33細(xì)胞組；3：DF-1+MG-132處理組1：DF-1cells；2：DF-....

圖2新城疫病毒對(duì)DF-1細(xì)胞26S蛋白酶體3個(gè)蛋白水解位點(diǎn)活性的影響

中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)第47卷圖2新城疫病毒對(duì)DF-1細(xì)胞26S蛋白酶體3個(gè)蛋白水解位點(diǎn)活性的影響Fig.2Effectontheactivityof26SproteasomeinDF-1cellswithNDVinfection1：DF-1細(xì)胞組；2：DF-1+Herts/33細(xì)胞組；3....

圖4泛素-蛋白酶體系統(tǒng)抑制劑對(duì)新城疫病毒復(fù)制的影響

第11期曲昱蓉等：DF-1細(xì)胞中泛素-蛋白酶體系統(tǒng)對(duì)新城疫病毒復(fù)制的影響2.5MG-132對(duì)NDV生長(zhǎng)狀況的影響DF-1細(xì)胞接種1MOIHerts/33病毒，在病毒感染后第2、4、6、8、12、24、36、48小時(shí)分別收集細(xì)胞上清，檢測(cè)上清中病毒TCID50。以病毒感染時(shí)間的Lo....

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