本研究從水牛腹股溝處脂肪組織中,通過膠原酶消化法分離出水牛脂肪干細胞(adipose-derived stem cells,ASCs),觀察原代及傳代后細胞形態(tài)。將分離得到的細胞用低糖-DMEM(Dulbecco,s modified Eagle，s medium low glucose,LG-DMEM)和 α-MEM(α modified Eagle's medium)培養(yǎng)和傳代,進行生長曲線的評定,建立一種適合水牛ASCs分離和培養(yǎng)的方法。利用反轉錄聚合酶鏈式反應(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法檢測水牛ASCs多能性相關基因表達情況,選擇適當抗體,利用流式細胞技術,檢測水牛ASCs多種表面抗原的表達情況,將水牛ASCs體外誘導分化(成脂、成骨、成軟骨)后進行相關檢測,初步探索水牛ASCs的誘導分化能力。利用實時熒光定量PCR(quantitive real time PCR,qRT-PCR)的方法檢測水牛ASCs表觀遺傳修飾情況,探索水牛ASCs作為供體細胞并提高核移植效率的可行性。研究取得如下結果...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１水牛ＡＳＣｓ形態(tài)學觀察結果??

胞核較暗；接種３ｈ后ＡＳＣｓ開始貼壁，２４ｈ后首次換液時觀察發(fā)現(xiàn)細胞呈梭型或成??纖維狀，４８ｈ后開始伸展并呈現(xiàn)多角形，胞核位于細胞中央，胞漿對比明顯；７－８ｄ時細??胞呈成纖維細胞樣生長，細胞集落呈現(xiàn)旋渦狀；每代細胞之間沒有明顯的形態(tài)學差異。??ｖ??ｆｔ??原代?２４ｈ?（４....

圖2-2水牛ASCs生長曲線

廣西大學領士學位論文水牛脂肪干細胞生物學特性及表觀遺傳修飾檢測的初步研究??３．２生長曲線的測定??選取生長狀況良好的Ｐ３代（３）、Ｐ５代（３）、Ｐ６代（￥）水牛ＡＳＣｓ進行生長曲??線測定。由生長曲線得知，細胞接種于２４孔板后，經過ｌ－２ｄ的調整期后細胞進入對數(shù)??生長期，第六....

圖２４水牛ＡＳＣ核型分析??Ｆｉｇ．２－４?Ｋａｒｙｏｔｙｐｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｂｕｆｆａｌｏ?ＡＳＣ??

Ｍ：?ＭａｒｃＭ?Ｍ?０?Ｓ?Ｎ?Ｋ?ＣＭ?〇＝?〇〇ｔＷ＾?：：?Ｓ：?Ｓｏｘ２ＬＭ?■?Ｉ?Ｎ＝?Ｎａｎ電�。海В�?Ｋ：?Ｋｌｆｊ聲‘?Ｉ?ｃＭ：?ｃ－圖２－３水牛ＡＳＣｓ多能性相關基因?Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｇｅｎｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｂ０代....

圖２－３水牛ＡＳＣｓ多能性相關基因表達??Ｆｉｇ２－３?Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｇｅｎｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｂｕｆｆａｌｏ?ＡＳＣｓ??

由此結果可見，水牛ＡＳＣｓ經體外長期培養(yǎng)后仍可以保持較高的正常核型比率。??雜??圖２４水牛ＡＳＣ核型分析??Ｆｉｇ．２－４?Ｋａｒｙｏｔｙｐｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｂｕｆｆａｌｏ?ＡＳＣ??４分析與討論??ＢＭＳＣｓ是一種存在于骨髓組織中的成體干細胞，具有多向分化潛能，體外....

本文編號：4028706