豬腸外致病性大腸桿菌分離鑒定及雙基因缺失突變株構(gòu)建
發(fā)布時(shí)間:2024-05-30 23:06
大腸埃希氏菌(Escherichia Coli,E.Coli)通常稱為大腸桿菌,學(xué)術(shù)界根據(jù)其臨床致病性將其分為三類:共生型大腸桿菌,腸內(nèi)致病性大腸桿菌,腸外致病性大腸桿菌。 共生型大腸桿菌與宿主是互利共生的關(guān)系,并伴隨其終生,經(jīng)糞便散播到周圍環(huán)境中,一般不致;腸內(nèi)致病性大腸桿菌廣泛存在于少數(shù)宿主的腸道內(nèi)和環(huán)境中,機(jī)體免疫功能正常時(shí)一般不會引起腸道外的感染,但免疫力低下時(shí)會出現(xiàn)腸道外的感染;腸外致病性大腸桿菌(Extraintestinal Pathogenic Escherichia Coli,ExPEC)可使不同的宿主發(fā)生泌尿道感染(UPEC)、腦膜炎(NMEC)、敗血癥(Septicemia)、肺炎(Pneumonia)、腹膜炎(Pleurisy)及其它腸外軟組織感染(Soft Tissue Infections),因此受到醫(yī)學(xué)界普遍關(guān)注,ExPEC與其他病菌的混合感染,給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。 基于以上所述腸外致病性大腸桿菌的危害我們開展了本實(shí)驗(yàn),旨在通過對臨床分離的腸外致病性大腸桿菌進(jìn)行研究,掌握ExPEC的流行病學(xué)規(guī)律,為該病的診斷與防治打下基礎(chǔ);另外開展了豬源腸外致...
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略詞表
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 大腸桿菌危害
1.2 大腸桿菌病原學(xué)
1.2.1 生理生化特性
1.2.2 流行病學(xué)
1.3 大腸桿菌致病機(jī)制
1.4 大腸桿菌防治
1.4.1 藥物防治
1.4.2 疫苗防治
2 研究目的與意義
3 材料及方法
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 病料、菌株和培養(yǎng)條件
3.1.2 試劑及主要儀器
3.1.3 培養(yǎng)基及主要溶液的配制
3.1.4 試驗(yàn)動物
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 分菌鑒定
3.2.2 基因工程疫苗的研制
4 結(jié)果與分析
4.1 分離鑒定試驗(yàn)結(jié)果
4.1.1 培養(yǎng)特性
4.1.2 PCR鑒定結(jié)果
4.1.3 毒力基因檢測
4.1.4 PCR分群試驗(yàn)結(jié)果
4.1.5 藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果
4.2 重組自殺性質(zhì)粒pREΔiucb的構(gòu)建
4.2.1 iucB基因上下游片段的擴(kuò)增
4.2.2 質(zhì)粒pSKΔiucB的構(gòu)建
4.2.3 質(zhì)粒pREΔiucB的構(gòu)建
4.3 缺失株的篩選和鑒定
4.4 突變株生長特性的研究
4.5 缺失菌株對小鼠的毒力試驗(yàn)及LD50的測定
5 討論
5.1 ExPEC流行病學(xué)
5.1.1 流行規(guī)律
5.1.2 PCR分群
5.1.3 藥敏試驗(yàn)
5.2 ExPEC雙基因缺失株的構(gòu)建
5.2.1 基因工程疫苗
5.2.2 靶位基因的選擇
5.2.3 重組自殺性質(zhì)粒的構(gòu)建
5.2.4 基因缺失株的篩選鑒定
5.2.5 基因缺失株的生物學(xué)培養(yǎng)特性
5.2.6 展望
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3984814
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略詞表
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 大腸桿菌危害
1.2 大腸桿菌病原學(xué)
1.2.1 生理生化特性
1.2.2 流行病學(xué)
1.3 大腸桿菌致病機(jī)制
1.4 大腸桿菌防治
1.4.1 藥物防治
1.4.2 疫苗防治
2 研究目的與意義
3 材料及方法
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 病料、菌株和培養(yǎng)條件
3.1.2 試劑及主要儀器
3.1.3 培養(yǎng)基及主要溶液的配制
3.1.4 試驗(yàn)動物
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 分菌鑒定
3.2.2 基因工程疫苗的研制
4 結(jié)果與分析
4.1 分離鑒定試驗(yàn)結(jié)果
4.1.1 培養(yǎng)特性
4.1.2 PCR鑒定結(jié)果
4.1.3 毒力基因檢測
4.1.4 PCR分群試驗(yàn)結(jié)果
4.1.5 藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果
4.2 重組自殺性質(zhì)粒pREΔiucb的構(gòu)建
4.2.1 iucB基因上下游片段的擴(kuò)增
4.2.2 質(zhì)粒pSKΔiucB的構(gòu)建
4.2.3 質(zhì)粒pREΔiucB的構(gòu)建
4.3 缺失株的篩選和鑒定
4.4 突變株生長特性的研究
4.5 缺失菌株對小鼠的毒力試驗(yàn)及LD50的測定
5 討論
5.1 ExPEC流行病學(xué)
5.1.1 流行規(guī)律
5.1.2 PCR分群
5.1.3 藥敏試驗(yàn)
5.2 ExPEC雙基因缺失株的構(gòu)建
5.2.1 基因工程疫苗
5.2.2 靶位基因的選擇
5.2.3 重組自殺性質(zhì)粒的構(gòu)建
5.2.4 基因缺失株的篩選鑒定
5.2.5 基因缺失株的生物學(xué)培養(yǎng)特性
5.2.6 展望
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3984814
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