鑒別豬偽狂犬病毒gE/gB/gG的納米PCR及熒光定量PCR方法的建立及評價(jià)
發(fā)布時(shí)間:2024-05-25 14:02
豬偽狂犬病毒(porcine pesudorabies virus, PRV)屬于皰疹病毒科、皰疹病毒屬,顆粒呈球形,成熟的病毒粒子直徑約為150-180nm,病毒粒子內(nèi)部包裹著二十面體的核衣殼,其直徑約為100-110nm,基因組位于核衣殼內(nèi)部,呈卷曲纏繞狀排布,核衣殼外部為病毒囊膜,為脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu),囊膜表面為10nm左右的纖突。PRV可以引起多種家畜的感染,其中豬是最主要的儲(chǔ)存宿主和傳染源,該病毒在豬體內(nèi)可引起豬偽狂犬病(PR),是一種高度傳染性疾病,本病的暴發(fā)能夠給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失,主要包括妊娠母豬的高流產(chǎn)率、產(chǎn)死胎或者木乃伊胎等繁殖障礙;成年豬的呼吸系統(tǒng)疾病;仔豬神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、震顫、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、腹瀉等。成年豬多耐過而在初生仔豬中死亡率可達(dá)100%,耐過的成年豬體內(nèi)持續(xù)帶毒并排毒,造成本病的多發(fā)。基因缺失苗的免疫是當(dāng)前防控PRV的主要措施。 本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用納米PCR和熒光定量PCR建立了快速、敏感、檢出期早并能鑒別疫苗株還是野毒株的兩種診斷方法。其中納米PCR根據(jù)野毒株和疫苗株均存在ga基因而疫苗株缺失gE基因(也存在gG缺失株)的特點(diǎn),針對全病毒基因組設(shè)計(jì)了三對引物,分別...
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號(hào):3982203
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圖2.1PRV-gB基因的擴(kuò)增結(jié)果
M:DL2000Marker;1;Negativecontrol;23:PRV-gB圖2.1PRV-gB基因的擴(kuò)增結(jié)果Fig.2.1TheamplificationofPRV-gB
圖2.2PRV納米PCR退火溫度的優(yōu)化
M:DL2000Marker,1:Negativecontrol;2-11:50-59?C退火溫度圖2.2PRV納米PCR退火溫度的優(yōu)化Fig,2.2OptimizationofamplificationtemperatureofPRVnanoP....
圖2.3PRV納米PCR引物濃度的優(yōu)化
ioot>pM:DL2000Marker;1:Negativecontrol;2-7:0.3-1.8^iL引物添加量圖2.3PRV納米PCR引物濃度的優(yōu)化Fig.2.3OptimizationofprimerconcentrationsofPRV....
圖2.4PRV納米PCR模板濃度的優(yōu)化
M:DL2000Marker;1:Negativecontrol;2-7:0.3-1.8^iL模板添加量圖2.4PRV納米PCR模板濃度的優(yōu)化Fig.2.4OptimizationoftemplatesconcentrationsofPRVna....
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