目的研究基因S100A8和S100A9是否可能參與雌激素對輸卵管的功能調(diào)控,并探討它們對輸卵管可能的影響。方法免疫組織化學(xué)法檢測S100A8和S100A9在健康間情期,綿羊輸卵管壺腹部中的基礎(chǔ)表達(dá)及分布;利用E₂作用綿羊輸卵管上皮細(xì)胞,在不同作用時(shí)間及不同濃度E₂作用下,q-PCR及免疫熒光法檢測輸卵管上皮細(xì)胞S100A8和S100A9 mRNA及蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果在健康間情期綿羊輸卵管,S100A8和S100A9高表達(dá)于黏膜上皮及腺上皮,并在血管中也有表達(dá)。輸卵管上皮細(xì)胞在高濃度E₂作用下,S100A8和S100A9的表達(dá)在不同時(shí)間出現(xiàn)動態(tài)變化,并均在E₂作用6 h后出現(xiàn)表達(dá)高峰,在該時(shí)間下不同濃度的E₂均顯著誘導(dǎo)S100A8和S100A9的高表達(dá),但在10^-7 mol·L^-1和10^-8 mol·L^-1濃度下表達(dá)最高,兩組差異不顯著。結(jié)論輸卵管上皮細(xì)胞中S100A8和S100A9受到雌激...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要儀器、材料和試劑
    1.2 免疫組織化學(xué)檢測綿羊輸卵管組織中S100A8、S100A9蛋白表達(dá)
    1.3 輸卵管上皮細(xì)胞培養(yǎng)
    1.4 17-β雌二醇對綿羊輸卵管上皮細(xì)胞S100A8、S100A9 mRNA表達(dá)的影響
        1.4.1 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Quantitative real-time PCR,q-PCR)引物的設(shè)計(jì)與合成
        1.4.2 RNA提取、反轉(zhuǎn)錄及q-PCR測定
        1.4.3 17-β雌二醇對綿羊輸卵管上皮細(xì)胞的作用
    1.5 17-β雌二醇對綿羊輸卵管上皮細(xì)胞S100A8、S100A9蛋白表達(dá)的影響
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 S100A8及S100A9蛋白在綿羊輸卵管的表達(dá)及分布
    2.2 17-β雌二醇對輸卵管上皮細(xì)胞S100A8及S100A9 mRNA表達(dá)的影響
        2.2.1 RNA質(zhì)量驗(yàn)證及熒光定量引物驗(yàn)證
        2.2.2 輸卵管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)及建系
        2.2.3 雌激素作用下S100A8及S100A9表達(dá)與時(shí)間的動態(tài)變化
        2.2.4 不同濃度雌激素對S100A8及S100A9表達(dá)的影響
        2.2.5 輸卵管上皮細(xì)胞S100A8及S100A9基因的相關(guān)性
    2.3 17-β雌二醇對綿羊輸卵管上皮細(xì)胞S100A8、S100A9蛋白表達(dá)的影響
3 討論



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