禽戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus，HEV）是2001年由美國學(xué)者從患肝炎脾大綜合癥（hepatitis-splenomegaly, HS）或大肝大脾�。˙ig liver and spleen disease, BLS）的雞中分離出的一種新型病毒。該病毒主要引起肝炎脾大綜合癥，導(dǎo)致30-72周齡的肉種雞和蛋雞的產(chǎn)蛋率下降（20%-40%），易產(chǎn)軟殼蛋，死淘率升高（1%-4%），感染雞通常腹部充血，肝臟的淀粉樣變性，伴隨有肝臟和脾臟的腫大。 禽HEV的基因組全長為6.6kb，由3個(gè)開放閱讀框（Open Reading Frame, ORFs）和兩個(gè)非編碼區(qū)組成。第一個(gè)開放閱讀框（ORF1）編碼一個(gè)含多個(gè)功能域的非結(jié)構(gòu)蛋白，ORF2編碼非結(jié)構(gòu)蛋白，和ORF2部分重疊的ORF3編碼一種小的磷酸化蛋白。一直以來對ORF3功能的研究仍相對較少，大多集中在ORF2編碼的衣殼蛋白上，ORF2蛋白含多個(gè)抗原表位，是疫苗研究的重點(diǎn)。但近年來發(fā)現(xiàn)，ORF3蛋白在病毒顆粒的裝配釋放、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞骨架裝配等方面均發(fā)揮重要作用，并且含有能夠刺激動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈免疫反應(yīng)的抗原表位。 本研究...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖2-1avianHEVORF3基因擴(kuò)增結(jié)果

2-1avianHEVORF3基因擴(kuò)增.2-1ApplicationofavianHEVORFteinmarker;1:AvianHEVORF3;2定pET-28a（+）載體雙酶切，連定重組質(zhì)粒（圖2-2），陽性質(zhì)

圖2-2重組質(zhì)粒pET28a-ORF3的雙酶切鑒定Fig.2-2IdentificationoftherecombinantplasmidpET28a-ORF3usingenzymedigestion

2-1avianHEVORF3基因擴(kuò)增結(jié).2-1ApplicationofavianHEVORF3teinmarker;1:AvianHEVORF3;2:定pET-28a（+）載體雙酶切，連定重組質(zhì)粒（圖2-2），陽性質(zhì)

圖2-4原核表達(dá)禽HEVORF3蛋白的抗原性分析

目的蛋白ORF3的表icationofavianHEVObacteriallysatsat0,4,6ane5:Supernatantoft鑒定清為一抗，Western現(xiàn)棕色條帶（圖2

圖2-3目的蛋白ORF3的表達(dá)與純化

圖2-3目的蛋白ORF3的表達(dá)與純化sionandpurificationofavianHEVORF3proteiEanalysisofbacteriallysatsat0,4,6afterIPTGRF3protein;lane5:Su....

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