發(fā)布時(shí)間：2024-05-12 22:01

　　化膿隱秘桿菌Trueperella pyogenes是我國(guó)Ⅰ級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物林麝Moschus berezovskii的化膿病原發(fā)病原菌,但在化膿病后期的病灶中常能檢測(cè)到大量銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa。雖然在病灶中能同時(shí)分離到這2種病原菌,但是它們的種間關(guān)系以及優(yōu)勢(shì)菌轉(zhuǎn)換機(jī)制很大程度上未知。本研究通過(guò)構(gòu)建多種銅綠假單胞菌群體感應(yīng)基因敲除菌株并結(jié)合平板距離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),探討了化膿隱秘桿菌與銅綠假單胞菌的種間互作關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn),野生型銅綠假單胞菌的胞外產(chǎn)物可以顯著抑制化膿隱秘桿菌的生長(zhǎng);不同銅綠假單胞菌群體感應(yīng)關(guān)鍵基因缺失菌株均表現(xiàn)出對(duì)化膿隱秘桿菌不同程度的抑制作用,但與單突變菌株相比,lasR和rhlR雙突變菌株對(duì)化膿隱秘桿菌的抑制作用明顯減弱。這些發(fā)現(xiàn)表明,銅綠假單胞菌可以通過(guò)群體感應(yīng)系統(tǒng)介導(dǎo)的胞外產(chǎn)物來(lái)提高對(duì)化膿隱秘桿菌的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。因此,本研究為林麝化膿病過(guò)程中的優(yōu)勢(shì)病原菌的替換和病情惡化甚至死亡提供了合理的解釋,也有助于進(jìn)一步提高對(duì)林麝化膿病病理的認(rèn)識(shí)、治療方案的改進(jìn)和新型抗感染藥物的研發(fā)。

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

圖1不同銅綠假單胞菌菌株lasR基因的敲除

以野生型銅綠假單胞菌PAO1基因組DNA為模板,分別擴(kuò)增出橫跨lasR基因上游496bp序列(前同源臂)與下游577bp序列(后同源臂),并以pRU1103質(zhì)粒為模板擴(kuò)增出慶大霉素抗性基因元件(917bp),膠回收后用OverlapPCR進(jìn)行片段連接與擴(kuò)增。瓊脂糖凝膠電泳....

圖2不同基因型的銅綠假單胞菌與化膿隱秘桿菌平板互作表型實(shí)驗(yàn)

銅綠假單胞菌菌落近端的化膿隱秘桿菌菌落均不同程度地小于遠(yuǎn)端的菌落,而銅綠假單胞菌的生長(zhǎng)則沒(méi)有顯著變化(圖2)。不同的銅綠假單胞菌QS突變菌株均對(duì)化膿隱秘桿菌的生長(zhǎng)表現(xiàn)出一定的抑制作用,且抑制效果隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而更明顯(圖3)。圖3平板互作表型實(shí)驗(yàn)中化膿隱秘桿菌的菌落規(guī)模

圖3平板互作表型實(shí)驗(yàn)中化膿隱秘桿菌的菌落規(guī)模

圖2不同基因型的銅綠假單胞菌與化膿隱秘桿菌平板互作表型實(shí)驗(yàn)對(duì)上述平板互作中近端化膿隱秘桿菌的菌落規(guī)模進(jìn)行橫向比較發(fā)現(xiàn),不同銅綠假單胞菌群體突變菌株對(duì)鄰近化膿隱秘桿菌的生長(zhǎng)有不同程度的抑制作用,尤其從第2天開(kāi)始,各突變菌株對(duì)化膿隱秘桿菌的抑制效果均弱于野生型銅綠假單胞菌菌株。與野....

圖4不同銅綠假單胞菌群體感應(yīng)突變菌株對(duì)近端化膿隱秘桿菌的抑制作用對(duì)比

對(duì)上述平板互作中近端化膿隱秘桿菌的菌落規(guī)模進(jìn)行橫向比較發(fā)現(xiàn),不同銅綠假單胞菌群體突變菌株對(duì)鄰近化膿隱秘桿菌的生長(zhǎng)有不同程度的抑制作用,尤其從第2天開(kāi)始,各突變菌株對(duì)化膿隱秘桿菌的抑制效果均弱于野生型銅綠假單胞菌菌株。與野生型菌株相比,只有將銅綠假單胞菌QS調(diào)控系統(tǒng)中的lasR和r....

本文編號(hào)：3971957