精液受到細菌污染會嚴重影響精子功能,目前對細菌影響精子的機制研究大多集中在細菌代謝產(chǎn)物引起精子氧化應(yīng)激或者凋亡,其中主要的代謝產(chǎn)物是毒素因子。所有的革蘭氏陰性菌和部分革蘭氏陽性菌都會分泌胞外囊泡,這些囊泡不僅是細菌間交流的一種方式,也因攜帶毒素有侵襲作用。那么細菌是否也會通過胞外囊泡的形式對精子產(chǎn)生作用,目前并無相關(guān)報道。本研究利用常規(guī)人工采精獲得種公豬的精液,分離鑒定精液中細菌類型,并獲取其中一株優(yōu)勢細菌分析了細菌特性和外分泌特性,分離鑒定了細菌胞外囊泡,進一步研究了細菌胞外囊泡在豬精液保存過程中對精子生物功能的影響,探討細菌通過其胞外囊泡影響精子的可能途徑和機制。獲得以下主要結(jié)果:(1)從8頭關(guān)中黑豬種豬的40份精液中分離并鑒定出6株細菌。分別是奇異變形菌、假單胞桿菌、梭形芽孢桿菌、埃希氏菌屬、瓊氏不動桿菌、蠟樣芽孢桿菌。選取了其中的優(yōu)勢菌株--奇異變形菌分離胞外囊泡。奇異變形菌是革蘭氏陰性菌,其分泌的胞外囊泡又稱外膜囊泡(OMVs)。OMVs是脂質(zhì)雙分子層包裹的直徑在20-250nm的球型顆粒,脂質(zhì)最外層包裹脂多糖(LPS)。根據(jù)OD600值繪制奇異變形菌的生長曲線,培養(yǎng)9 h左...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1細菌16SrRNA的PCR鑒定與部分比對結(jié)果

取5個視野測量5次。分析菌的分離鑒定關(guān)中黑豬的新鮮精液40份，分別在營養(yǎng)瓊脂板培養(yǎng)24h后細菌的部分16srRNA序列（27bp-1492bp），PCR產(chǎn)物純化后I上進行BLAST比對，確定細菌的種屬。圖3-1A是細菌DNA3-1B是部分序列....

圖3-2精液細菌分離鑒定

圖3-2精液細菌分離鑒定。A40份精液中分離出的細菌種類及每種細菌的菌落數(shù)；B分別含有1種、2種、3種、4-6種細菌的精液占所有精液樣品的比例Figure3-2Identificationofmicrobesfromboarsemen.A,Micr....

圖3-3奇異變形菌特性

圖3-2精液細菌分離鑒定。A40份精液中分離出的細菌種類及每種細菌的菌落數(shù)；B分別含有1種、2種、3種、4-6種細菌的精液占所有精液樣品的比例Figure3-2Identificationofmicrobesfromboarsemen.A,Micr....

圖3-4奇異變形菌OMVs鑒定

圖3-4奇異變形菌OMVs鑒定。A粒徑測量結(jié)果；B掃描電鏡結(jié)果Figure3-4IsolationandidentificationofOMVsfromProteusmirabilis.A,DiameterofOMVs；B,Electronmi....

本文編號：3970875