精液受到細(xì)菌污染會(huì)嚴(yán)重影響精子功能,目前對(duì)細(xì)菌影響精子的機(jī)制研究大多集中在細(xì)菌代謝產(chǎn)物引起精子氧化應(yīng)激或者凋亡,其中主要的代謝產(chǎn)物是毒素因子。所有的革蘭氏陰性菌和部分革蘭氏陽(yáng)性菌都會(huì)分泌胞外囊泡,這些囊泡不僅是細(xì)菌間交流的一種方式,也因攜帶毒素有侵襲作用。那么細(xì)菌是否也會(huì)通過(guò)胞外囊泡的形式對(duì)精子產(chǎn)生作用,目前并無(wú)相關(guān)報(bào)道。本研究利用常規(guī)人工采精獲得種公豬的精液,分離鑒定精液中細(xì)菌類型,并獲取其中一株優(yōu)勢(shì)細(xì)菌分析了細(xì)菌特性和外分泌特性,分離鑒定了細(xì)菌胞外囊泡,進(jìn)一步研究了細(xì)菌胞外囊泡在豬精液保存過(guò)程中對(duì)精子生物功能的影響,探討細(xì)菌通過(guò)其胞外囊泡影響精子的可能途徑和機(jī)制。獲得以下主要結(jié)果:(1)從8頭關(guān)中黑豬種豬的40份精液中分離并鑒定出6株細(xì)菌。分別是奇異變形菌、假單胞桿菌、梭形芽孢桿菌、埃希氏菌屬、瓊氏不動(dòng)桿菌、蠟樣芽孢桿菌。選取了其中的優(yōu)勢(shì)菌株--奇異變形菌分離胞外囊泡。奇異變形菌是革蘭氏陰性菌,其分泌的胞外囊泡又稱外膜囊泡(OMVs)。OMVs是脂質(zhì)雙分子層包裹的直徑在20-250nm的球型顆粒,脂質(zhì)最外層包裹脂多糖(LPS)。根據(jù)OD600值繪制奇異變形菌的生長(zhǎng)曲線,培養(yǎng)9 h左...

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1細(xì)菌16SrRNA的PCR鑒定與部分比對(duì)結(jié)果

取5個(gè)視野測(cè)量5次。分析菌的分離鑒定關(guān)中黑豬的新鮮精液40份，分別在營(yíng)養(yǎng)瓊脂板培養(yǎng)24h后細(xì)菌的部分16srRNA序列（27bp-1492bp），PCR產(chǎn)物純化后I上進(jìn)行BLAST比對(duì)，確定細(xì)菌的種屬。圖3-1A是細(xì)菌DNA3-1B是部分序列....

圖3-2精液細(xì)菌分離鑒定

圖3-2精液細(xì)菌分離鑒定。A40份精液中分離出的細(xì)菌種類及每種細(xì)菌的菌落數(shù)；B分別含有1種、2種、3種、4-6種細(xì)菌的精液占所有精液樣品的比例Figure3-2Identificationofmicrobesfromboarsemen.A,Micr....

圖3-3奇異變形菌特性

圖3-2精液細(xì)菌分離鑒定。A40份精液中分離出的細(xì)菌種類及每種細(xì)菌的菌落數(shù)；B分別含有1種、2種、3種、4-6種細(xì)菌的精液占所有精液樣品的比例Figure3-2Identificationofmicrobesfromboarsemen.A,Micr....

圖3-4奇異變形菌OMVs鑒定

圖3-4奇異變形菌OMVs鑒定。A粒徑測(cè)量結(jié)果；B掃描電鏡結(jié)果Figure3-4IsolationandidentificationofOMVsfromProteusmirabilis.A,DiameterofOMVs；B,Electronmi....

本文編號(hào)：3970875