胰島素樣生長(zhǎng)因子1(Insulin-like growth factor-1，IGF1)因其結(jié)構(gòu)與胰島素類似而得名。IGF1能有效促進(jìn)骨骼肌生長(zhǎng)同時(shí)增強(qiáng)再生肌肉的收縮力，而且能夠激活RNA聚合酶等活性，促進(jìn)非組蛋白的磷酸化，提高mRNA水平，從而刺激RNA和DNA的合成，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，推動(dòng)細(xì)胞依次經(jīng)歷細(xì)胞周期的各個(gè)時(shí)期。IGF1如何影響綿羊成肌細(xì)胞的機(jī)制目前仍不十分清楚，本研究通過分析IGF1在綿羊成肌細(xì)胞增殖和分化中的作用探討IGF1促進(jìn)肌肉生長(zhǎng)的分子機(jī)制。 本研究克隆了綿羊IGF1基因，將其與慢病毒表達(dá)載體(pLEX-mcs)連接，構(gòu)建了IGF1真核表達(dá)載體，建立了IGFI穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的綿羊成肌細(xì)胞系，采用細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定、流式細(xì)胞術(shù)以及免疫熒光進(jìn)一步分析了在過表達(dá)情況下IGF1對(duì)綿羊成肌細(xì)胞增殖分化的影響。同時(shí)，通過RT-PCR、Realtime PCR檢測(cè)了過表達(dá)IGF1綿羊成肌細(xì)胞中與增殖和分化相關(guān)基因的表達(dá)變化，從細(xì)胞水平探討了IGF1對(duì)綿羊成肌細(xì)胞增殖分化的作用機(jī)制。本研究獲得主要數(shù)據(jù)和結(jié)果如下： 1、克隆了518bp綿羊IGF1全長(zhǎng)編碼區(qū)序列并在綿羊成肌細(xì)胞中過表達(dá)IGF1...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 概述
    1.1 骨骼肌的結(jié)構(gòu)及生長(zhǎng)機(jī)理
    1.2 IGF1 及部分相關(guān)基因的研究進(jìn)展
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)基因方法研究進(jìn)展
    1.4 本研究的目的及意義
第2章 IGF1 在綿羊成肌細(xì)胞中的穩(wěn)定表達(dá)
    2.1 材料與方法
    2.2 結(jié)果與分析
    2.3 討論
第3章 IGF1 在綿羊成肌細(xì)胞中的增殖作用
    3.1 材料與方法
    3.2 結(jié)果與分析
    3.3 討論
第4章 IGF1 在綿羊成肌細(xì)胞中的分化作用
    4.1 材料與方法
    4.2 結(jié)果與分析
    4.3 討論
第5章 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3954954