【目的】明確含溴結(jié)構(gòu)域蛋白2(BRD2)的亞細(xì)胞定位及其表達(dá)特征,為后續(xù)研究BRD2基因調(diào)控雞組織發(fā)育的作用機(jī)制提供參考依據(jù)�！痉椒ā客ㄟ^構(gòu)建雞BRD2基因重組真核表達(dá)載體pEGFP-BRD2,轉(zhuǎn)染人胚胎腎細(xì)胞(HEK-293T)后檢測重組蛋白EGFP-BRD2的表達(dá)情況及亞細(xì)胞定位;利用實(shí)時熒光定量PCR分別檢測雞胚14胚齡(E14 d)、雞出殼后1日齡(1 d)、7日齡(7 d)和14日齡(14 d)4個時間點(diǎn)各組織中BRD2基因的表達(dá)情況�！窘Y(jié)果】重組真核表達(dá)載體pEGFP-C1-BRD2轉(zhuǎn)染HEK-293T細(xì)胞獲得的融合蛋白EGFP-BRD2約115.00 kD,且主要定位在細(xì)胞核。實(shí)時熒光定量PCR檢測結(jié)果表明,雞BRD2基因在E14 d和1 d肌胃中的相對表達(dá)量最高,在7和14 d肺臟中的相對表達(dá)量最高。BRD2基因在各組織的表達(dá)規(guī)律為:在眼球內(nèi)E14 d到14 d的表達(dá)先下降后趨于穩(wěn)定;在腦組織和心臟內(nèi)的表達(dá)在E14 d至14 d間呈先下降后上升的變化趨勢;在肝臟內(nèi)E14 d表達(dá)穩(wěn)定,1 d后開始逐漸增加,至14 d時達(dá)最高值;在肺臟中E14 d的表達(dá)下降,1 d后急劇上...

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 供試動物
    1.2 細(xì)胞、載體和試劑
    1.3 引物合成
    1.4 重組真核表達(dá)載體p EGFP-BRD2構(gòu)建
    1.5 融合蛋白表達(dá)分析
    1.6 融合蛋白亞細(xì)胞定位分析
    1.7 總RNA提取及c DNA合成
    1.8 BRD2基因在雞不同發(fā)育階段各組織中的表達(dá)分析
    1.9 統(tǒng)計分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 重組真核表達(dá)載體p EGFP-BRD2鑒定結(jié)果
    2.2 融合蛋白表達(dá)分析結(jié)果
    2.3 融合蛋白亞細(xì)胞定位分析結(jié)果
    2.4 BRD2基因在雞不同發(fā)育階段各組織中的表達(dá)規(guī)律分析結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論



本文編號：3950081