布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的危害嚴(yán)重的人畜共患病。近年來，我國(guó)動(dòng)物布病的發(fā)病率有所回升。當(dāng)前控制布病的關(guān)鍵問題是布魯氏菌致病機(jī)制和宿主抵抗布魯氏菌感染機(jī)制不完全清楚。但至今，有關(guān)羊抵抗布魯氏菌感染機(jī)制的研究報(bào)道較少。強(qiáng)毒株感染導(dǎo)致機(jī)體患病，弱毒株感染對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用卻不引起患病，說明不同毒力株布魯氏菌感染可引起機(jī)體產(chǎn)生不同的應(yīng)答反應(yīng)。因此，比較研究不同毒力株感染機(jī)體產(chǎn)生的不同應(yīng)答分子，能夠?yàn)轭A(yù)防、治療、檢測(cè)布魯氏菌病提供靶標(biāo)分子。布魯氏菌可分為6個(gè)種。其中，羊種布魯氏對(duì)我國(guó)危害較大。在眾多布病疫苗中，豬種布魯氏菌減毒疫苗S2在我國(guó)使用較為廣泛。因此，選擇羊種布魯氏菌強(qiáng)毒株和豬種布魯氏菌弱毒株S2進(jìn)行比較具有一定的代表性，比較結(jié)果更加具有現(xiàn)實(shí)意義。 為獲得布魯氏菌強(qiáng)弱毒株感染小尾寒羊差異表達(dá)基因，本項(xiàng)研究應(yīng)用抑制性差減雜交(SSH)技術(shù)構(gòu)建布魯氏菌強(qiáng)弱毒株感染小尾寒羊SSH cDNA文庫(kù)。采用鳥槍法對(duì)447個(gè)文庫(kù)細(xì)菌克隆進(jìn)行測(cè)序。利用熒光定量PCR證實(shí)免疫相關(guān)備選基因CD96基因在羊種布魯氏菌(B. melitensis)攻毒小尾寒羊第44天的外周血白細(xì)胞層中上調(diào)表達(dá)。應(yīng)用RACE技術(shù)...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1布魯氏菌的傳播途徑Fig.1-1TransmissionofBrucellosis

可為6個(gè)種，分別是：羊種布魯氏菌(Brucellamelitensillaabortus)、豬種布魯氏菌(Brucellasuis)、綿羊附睪vis)、沙林鼠種布魯氏菌(Brucellaneotomae)和犬種布魯其中，羊種布魯氏菌、牛種布魯氏菌、豬種布魯氏菌對(duì)人魯氏....

圖1-2布魯氏菌病的發(fā)病過程

圖1-2布魯氏菌病的發(fā)病過程Fig.1-2Pathogenesisofbrucellosis布魯氏菌抗感染免疫然免疫和特異性免疫在抵抗布魯氏菌感染中都發(fā)揮作用。而布魯氏宿主細(xì)胞、抵抗溶菌酶等殺菌物質(zhì)、抑制宿主細(xì)胞凋亡、從宿主細(xì)等途徑實(shí)現(xiàn)其在細(xì)胞內(nèi)的寄生。魯氏菌在感染宿主....

圖1-3菌體數(shù)量與機(jī)體免疫能力的關(guān)系

過粘附宿主細(xì)胞、抵抗溶菌酶等殺菌物質(zhì)、抑制宿主細(xì)胞凋亡、從宿主細(xì)胞中獲取營(yíng)養(yǎng)等途徑實(shí)現(xiàn)其在細(xì)胞內(nèi)的寄生。布魯氏菌在感染宿主過程中，菌體數(shù)量與機(jī)體的免疫能力的關(guān)系見圖1-3[24]。圖1-3菌體數(shù)量與機(jī)體免疫能力的關(guān)系Fig.1-3Therelationshipbetwe....

圖2.1SMARTcDNA合成PCR循環(huán)數(shù)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)Figure2.1OptimizingPCRparametersforSMARTPCRcDNAsynthesis

m/min離心1.5min，收集濾液。ARTPCRcDNA單鏈cDNA80μL滅菌超純水172μL10×Advantage2PCRBuffer30μL50×dNTP(10mM)6μL5/PCRprimerIIA6μL50×Advantage2....

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