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豬星狀病毒分離鑒定及其全基因組序列分析和衣殼蛋白原核表達(dá)

發(fā)布時間:2024-03-30 13:22
  星狀病毒(Astrovirus, AstV)是一類可感染人及其他多種動物的腸道疾病相關(guān)病原。目前該病毒已經(jīng)從人、豬、牛、蝙蝠、犬、貓等31種哺乳類動物和雞、火雞、鴨和鴿子等6種禽類中檢測出來,然而星狀病毒感染與動物腸道疾病之間的關(guān)系并沒有得到深入的了解。基因變異性已在許多種動物星狀病毒中發(fā)現(xiàn),但是由此產(chǎn)生的抗原性差異僅在人星狀病毒中得到證實。此外,越來越多的研究證據(jù)表明星狀病毒之間可以發(fā)生基因重組。由此可知,星狀病毒的多宿主性、基因差異性及其重組現(xiàn)象和跨種間傳播及適應(yīng)新宿主的能力,使得星狀病毒成為潛在的新興人畜共患病原。本研究旨在探究豬星狀病毒的分離培養(yǎng)特性和分析其遺傳變異規(guī)律和衣殼蛋白的抗原特性,從而為進(jìn)一步加深對豬星狀病毒的了解而提供一定的理論支持和實踐依據(jù)。 本研究采用RT-PCR檢測為豬星狀病毒陽性的豬糞便上清進(jìn)行病毒分離;在添加胰酶的條件下,分離得到1株能在PK-15細(xì)胞上穩(wěn)定增殖20代同時產(chǎn)生明顯細(xì)胞病變(CPE)的豬星狀病毒(PAstV-GX1)毒株,病毒的TCID50為10622/ml。然而在不添加胰酶條件下,病毒的致細(xì)胞病變能力顯著降低。通過采用常規(guī)PCR,3’RAC...

【文章頁數(shù)】:103 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-3星狀病毒基因組結(jié)構(gòu)[32IFig1-3GenomestructureofAstroviruses^"^^

圖1-3星狀病毒基因組結(jié)構(gòu)[32IFig1-3GenomestructureofAstroviruses^"^^'

星狀病毒基因組為單股TF.鏈RNA,雖然星狀病毒科各成員的基因組長度不一(6.17kb?7.72kb),但是其結(jié)構(gòu)基本相同(圖1-3)。病毒基因組包念5'和3'端非編碼區(qū)C5'UTR,3'UTR)和ORFla,ORFlb,0RF2三個幵放性閱讀框(ORFs);病毐基因組3'末端還....


圖1-4星狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋內(nèi)及推測的蛋白基因組結(jié)構(gòu)基序【-)21(▲:細(xì)胞內(nèi)蛋白醜,A:病逛合成蛋白晦,I::::、、推測的病毒蛋白酶酶切位點)

圖1-4星狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋內(nèi)及推測的蛋白基因組結(jié)構(gòu)基序【-)21(▲:細(xì)胞內(nèi)蛋白醜,A:病逛合成蛋白晦,I::::、、推測的病毒蛋白酶酶切位點)

p55065圖1-4星狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋內(nèi)及推測的蛋白基因組結(jié)構(gòu)基序【-)21(▲:細(xì)胞內(nèi)蛋白醜,A:病逛合成蛋白晦,I::::、、推測的病毒蛋白酶酶切位點)Fig1-4Nunstructuralproteinsandproteinstructuremotifs....


圖1-4.星狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白特征[32](A:半胱天冬酶酶切位點,A:胰酶酶切位點,A:推測的胰酶酶切位點)

圖1-4.星狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白特征[32](A:半胱天冬酶酶切位點,A:胰酶酶切位點,A:推測的胰酶酶切位點)

圖1-4.星狀病毒結(jié)構(gòu)蛋白特征[32](A:半胱天冬酶酶切位點,A:胰酶酶切位點,A:推測的胰酶酶切位點)Fig1-4.Featuresofstructuralproteins[32](Axaspasecleavagesites,A:trypsincleava....


圖2-1病毒IFA鑒定試驗方案

圖2-1病毒IFA鑒定試驗方案

作為IFA試驗的一抗。為減少試驗過程中存在非特異性結(jié)合的可能性,在IFA試驗操作過程中需做病毒陰性對照、血清陰性對照。具體試驗方案如圖2-1所示:((1:5。)人(1:5。)人(1:5。)I■■PAstV.nfectedMockinfectedf90 PBS iir\....



本文編號:3942418

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