雞滑液支原體(Mycoplasma Synoviae, MS)是雞的主要致病性支原體之一,其主要引起雞和火雞的關(guān)節(jié)腫大、滑液囊及肌腱發(fā)炎和實質(zhì)器官的腫大。雖然滑液支原體的感染不會引起家禽的直接死亡,但其一旦在雞群中感染就很難根除,其可在雞群中長期蔓延從而導(dǎo)致雞群的生長發(fā)育遲緩、死亡淘汰率增高、雞肉的品質(zhì)和雞蛋的產(chǎn)量大幅下降。最嚴重的是滑液支原體易與其他病原體發(fā)生交叉感染,加劇各病原體致病力,增加了死亡率,給養(yǎng)雞業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失。目前,針對滑液支原體的預(yù)防和治療的藥物很少并且相關(guān)研究的文獻也較少。因此,進行滑液支原體傳染和致病機理的研究,必將為滑液支原體預(yù)防和治療藥物的研發(fā)奠定基礎(chǔ)�；诖�,本人通過擴增獲得了滑液支原體WVU1853株乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase, LDH)的基因,并用它構(gòu)建了原核表達載體進行了表達,進而完成了LDH的酶促反應(yīng)動力學(xué)、細胞定位及其生物學(xué)功能的研究。 1.根據(jù)GenBank中雞滑液支原體(Mycoplasma synoviae, MS) MS53株的乳酸脫氫酶序列設(shè)計一對特異性上、下游引物,通過PCR擴增獲得MS WVU1853...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖6重組蛋白Westem-blot分析

這種蛋白可與MS和His-LDH特異性結(jié)合，大小分別為34kDa和36kDa(圖6)kDa12 ‘^36^34圖6重組蛋白Westem-blot分析Fig.6Westem-blotanalysisoftherecombinantprotein1：全菌蛋白....

圖1A:His-LDH與兔肌肉LDH活性比較;B:His-LDH濃度對酶促反應(yīng)速度的影響;C:底物（丙酮酸）濃度對酶促反應(yīng)速度的影響

兔肌肉LDH作為標(biāo)準(zhǔn)品，LDH純化蛋白作為粗酶液，兩種樣品比對酶活結(jié)果粗酶液活性略高（圖1A)，當(dāng)丙酮酸濃度不變時，LDH活性隨粗酶液量的增加而升高(圖IB)。當(dāng)丙酮酸濃度不同時LDH的酶活也有差異（圖1C)。-24-

圖2:A:溫度對酶活的影響;B:pH對酶活的影響;C:雙倒數(shù)法求酶的Km和最大反應(yīng)速率

1/(S)(mmol/1.)-1圖2:A:溫度對酶活的影響;B:pH對酶活的影響;C:雙倒數(shù)法求酶的Km和最大反應(yīng)速率Fig2:A:EffectoftemperatureonHis-LDHactivityinvitro;B:Effecto....

圖1MSWVU1853膜蛋白的Westem-blot

圖1MSWVU1853膜蛋白的Westem-blotnti-serumagainstHis-LDHbindstomembraneproteinsofMSWVU1853byWestem-blot.VU1853全菌蛋白；2:親水蛋白；3:膜蛋白；4....

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