金黃色葡萄球菌(以下簡(jiǎn)稱(chēng),金葡菌)奶牛乳房炎是奶牛乳腺組織受到金葡菌感染而引起的炎癥反應(yīng)。長(zhǎng)期的抗生素治療不僅加劇了致病菌的抗藥性,同時(shí)增大了藥物殘留所帶來(lái)的隱患。培育抗金葡菌奶牛乳房炎新品系成為了解決這一問(wèn)題的期望手段。MicroRNAs(以下簡(jiǎn)稱(chēng)miRNAs)可通過(guò)遏制其靶基因的翻譯或?qū)е掳谢蚪到舛l(fā)揮調(diào)控功能。因此,本研究旨在挖掘金葡菌乳房炎抗性相關(guān)miRNAs,并對(duì)其靶基因參與金葡菌奶牛乳房炎發(fā)生的調(diào)控機(jī)制進(jìn)行研究,以期為金葡菌奶牛乳房炎的早期診斷及抗性分子標(biāo)記輔助選擇的鑒定奠定基礎(chǔ),為揭示乳腺組織炎癥反應(yīng)發(fā)生的抗性機(jī)制研究提供依據(jù)。本研究首先通過(guò)體細(xì)胞計(jì)數(shù)、病原菌鑒定、奶樣PCR以及組織切片觀察等方法鑒定健康牛及金葡菌乳房炎患病牛,并利用高通量測(cè)序技術(shù)構(gòu)建乳腺組織miRNAs差異表達(dá)譜。經(jīng)生物信息學(xué)分析,對(duì)差異表達(dá)miRNAs進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)及功能注釋分析,獲得金葡菌乳房炎抗性相關(guān)miRNAs,并利用RT-qPCR對(duì)其進(jìn)行鑒定。進(jìn)而,利用生物信息學(xué)技術(shù)預(yù)測(cè)金葡菌乳房炎抗性相關(guān)miRNA的候選靶基因,并利用細(xì)胞培養(yǎng)、miRNA轉(zhuǎn)染、RT-qPCR、Western Blot、種子...

【文章頁(yè)數(shù)】：102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1奶牛乳房炎病原菌分離鑒定結(jié)果

363.1.2奶牛乳汁分離病原菌的鑒定對(duì)1號(hào)、4號(hào)、8號(hào)牛，以及2號(hào)、6號(hào)、7號(hào)奶牛的乳汁進(jìn)行病原菌分離培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，在1號(hào)、4號(hào)和8號(hào)等三頭健康牛的乳汁中，并未分離獲得金葡菌及其他乳房炎致病菌；而在2號(hào)、6號(hào)和7號(hào)等三頭乳房炎奶牛中，分離獲得了大腸桿菌，鏈球菌和金葡菌等常見(jiàn)乳房炎致....

圖3-2金葡菌nuc基因奶樣PCR鑒定結(jié)果

結(jié)果與分析37圖3-2金葡菌nuc基因奶樣PCR鑒定結(jié)果Fig.3-2PCRidentificationresultsofmilksampleofS.aureusnucgene注：1-3：健康牛4-6：金葡菌乳房炎候選牛Note:1-3:Healthycows4-6:S.aure....

圖3-3奶牛乳腺組織切片觀察結(jié)果

結(jié)果與分析37圖3-2金葡菌nuc基因奶樣PCR鑒定結(jié)果Fig.3-2PCRidentificationresultsofmilksampleofS.aureusnucgene注：1-3：健康牛4-6：金葡菌乳房炎候選牛Note:1-3:Healthycows4-6:S.aure....

圖3-4六個(gè)文庫(kù)中小RNA的長(zhǎng)度分布

結(jié)果與分析39表3-3sRNA類(lèi)型注釋統(tǒng)計(jì)Table3-3sRNAtypeannotationstatisticsTypesS01S02S03S04S05S06Number(%)Number(%)Number(%)Number(%)Number(%)Number(%)scRNA0....

本文編號(hào)：3938150