日本腦炎(JE)是一種廣泛流行于亞洲和環(huán)太平洋地區(qū)的人獸共患傳染病，它影響著人類的健康并危害著畜牧業(yè)，特別是養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。其病原體日本腦炎病毒(JEV)是一種典型的蟲媒病毒，蚊子在該病毒的傳播過程中發(fā)揮著重要的作用�，F(xiàn)已報(bào)道自然界中有60多種動(dòng)物可感染JEV，其中多數(shù)物種感染病毒后沒有明顯的臨床癥狀，只能檢測到動(dòng)物血清高水平的中和抗體。 1.JEV EDIII結(jié)構(gòu)域蛋白的原核表達(dá)、多克隆抗體的制備與鑒定 JEV表面的囊膜蛋白(E蛋白)是該病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白之一，該蛋白主要由3個(gè)結(jié)構(gòu)域組成，其中結(jié)構(gòu)域III(E蛋白第312～411位氨基酸殘基)獨(dú)立地在病毒表面折疊成為免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)，為誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體的重要區(qū)域。實(shí)驗(yàn)中采用原核表達(dá)系統(tǒng)融合表達(dá)pET-32a-EIII蛋白，經(jīng)過Ni+柱純化后多次免疫新西蘭大白兔，制備兔抗JEV E蛋白多克隆抗體。間接ELISA結(jié)果表明，以原核表達(dá)的重組蛋白為抗原，檢測該多克隆抗體血清的效價(jià)為1:256000；Western-blot試驗(yàn)中，1:1000倍稀釋的多抗血清與1μg的重組蛋白反應(yīng)，能夠顯示出明顯的條帶，與經(jīng)過濃縮的JEV全病毒抗原反應(yīng)顯出一條分...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1世界范圍內(nèi)JE的流行分布圖（引自CDC網(wǎng)站）

圖1世界范圍內(nèi)JE的流行分布圖（引自CDC網(wǎng)站）Fig.1EpidemicdistributionofJapaneseencephalitisintheworld(fromCDCwebsite).1.2人感染JEV及治療感染JEV而發(fā)....

圖2中國每年JE發(fā)病與死亡人數(shù)分布（2001-2012）

圖2中國每年JE發(fā)病與死亡人數(shù)分布（2001-2012）Fig.2TheincidenceanddeathdateofJapaneseencephalitisin2001-2012,China1.1.3JE對畜牧業(yè)的影響JE的流行給畜牧業(yè)特....

圖3JEV的基因組結(jié)構(gòu)示意圖

抗乙型腦炎病毒E蛋白多克隆抗體的制備及寵物犬感染乙腦病毒血清中和抗體的流行病學(xué)調(diào)查降系數(shù)約為40-45S，在氯化銫中的浮密度約為1.24g/mL。JEV完整的基因組包括一個(gè)開放閱讀框（openreadingframe,ORF)和5'和3'端的非編碼區(qū)（noncoding....

圖4JEV的復(fù)制Fig.4Japaneseencephalitisvirusreplication

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)論文是與母鏈完全互補(bǔ)的新RNA鏈（即負(fù)鏈）(UchilandSatchidanandam,2003)。JEV的這種復(fù)制形式是不對稱的和半保留的，最終正鏈的量是負(fù)鏈的10-100倍。而所謂的黃病毒科病毒基因組的環(huán)化是通過5'和3'端非編碼區(qū)保守....

本文編號(hào)：3936151