禽腺病毒I群血清4型(FAdV-4)引起的以心包積液和肝炎為主要特征的禽病毒性傳染病,通常稱為心包積液-肝炎綜合征。該病早期報(bào)道是在1987年的巴基斯坦的安卡拉地區(qū),所以通常被稱為禽安卡拉病。1989年后該病在世界范圍內(nèi)流行,2015年在我國大面積暴發(fā)。該病發(fā)病迅速、傳播快,易感染3-5周齡的肉雞,死亡率在20%-80%之間。為了解目前禽安卡拉病的分子流行情況,探究遼寧省FAdV-4變異趨勢(shì),本實(shí)驗(yàn)室將疑似感染禽安卡拉病病料進(jìn)行分離鑒定和Penton、Fiber1、Fiber2基因克隆及遺傳進(jìn)化分析,具體試驗(yàn)結(jié)果如下:1.設(shè)計(jì)FAdV-4六鄰體基因片段的特異性引物,PCR擴(kuò)增病雞肝臟DNA,結(jié)果均在954 bp片段出現(xiàn)明亮的目的條帶。將結(jié)果和公開基因庫中分離株進(jìn)行對(duì)比,同源性達(dá)到99.9%,確定為FAdV-4病毒感染。2.接種9日齡SPF雞胚,尿囊液不對(duì)1%公雞紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集;以尿囊液DNA為模板,PCR鑒定出目的條帶,說明該病毒增殖成功;透射電鏡觀察,可見該病毒為直徑70-80 nm無囊膜的球形粒子,呈二十面體典型的禽腺病毒結(jié)構(gòu),表明禽腺病毒分離成功。3.以分離后的病毒液DNA為模板...

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圖1腺病毒的粒子結(jié)構(gòu)示意圖

圖1腺病毒的粒子結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1Thestructurepictureofadenovirusparticle毒的蛋白及功能白是組成腺病毒的主要部分，如前所述的六鄰體（He對(duì)六鄰體蛋白的結(jié)構(gòu)和功能已經(jīng)進(jìn)行了深入細(xì)致的基組成，所有的六鄰體分子都是其蛋白的同源三聚....

圖2六鄰體基因片段PCR擴(kuò)增結(jié)果

沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文離心機(jī)30000r/min,離心120min進(jìn)行洗糖，S緩沖液把沉淀重懸。使用熒光定量標(biāo)準(zhǔn)曲回來的不同梯度的病毒液病毒拷貝數(shù)檢測(cè)，檢察。板的PCR擴(kuò)增及測(cè)序結(jié)果新賓雞場病死雞肝臟中的DNA為模板，PCR擴(kuò)凝膠，結(jié)果在954bp處....

圖3撫順新賓株SPF雞胚剖檢結(jié)果

圖3撫順新賓株SPF雞胚剖檢結(jié)果Fig.3TheautopsyresultofFushunxinbinstrainSPFchickene注：左側(cè)：正常組；右側(cè)：病毒組Note:left:normalgroup;right:virusgroup....

圖4尿囊液的六鄰體基因片段PCR擴(kuò)增結(jié)果

圖3撫順新賓株SPF雞胚剖檢結(jié)果heautopsyresultofFushunxinbinstrainSPFchickene注：左側(cè)：正常組；右側(cè)：病毒組Note:left:normalgroup;right:virusgroup板的PCR....

本文編號(hào)：3922018