高致病性PRRSV毒株的分離及PRRSVRT-LAMP檢測方法的分析
發(fā)布時間:2024-03-07 20:23
豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的高度接觸性病毒傳染病,以仔豬呼吸障礙及妊娠母豬、公豬生殖障礙為主要特征,是嚴(yán)重危害全球養(yǎng)豬業(yè)的疾病之一。該病毒分為北美型和歐洲型兩個血清型,我國流行的PRRSV毒株主要為北美型PRRSV毒株。本研究對吉林地區(qū)兩個豬場的病豬進(jìn)行了病料采集,在Marc-145細(xì)胞上進(jìn)行了病毒的分離,經(jīng)盲傳后,病毒可在Marc-145細(xì)胞上產(chǎn)生明顯的病變,經(jīng)RT-PCR和免疫熒光鑒定,證明所分離到的病毒為PRRSV。將分離到的病毒分別命名為JILINTN1株和JILINTN2株。 根據(jù)GenBank中PRRSV HUN4株的序列設(shè)計引物,通過RT-PCR成功擴增了PRRSVJILINTN1和JILINTN2株的ORF567和NSP2基因。并將其克隆到pMD18-T載體上,通過測序和生物信息學(xué)分析我們發(fā)現(xiàn):針對GP5核苷酸序列的進(jìn)化樹顯示JILINTN1和JILINTN2株與其他北美型PRRSV毒株處在同一分支上,這兩個毒株的GP5,M和N基因與其他北美型的毒株同源性很高而與歐洲型毒株很低,說明這兩個毒株屬于北美型的毒株。對NSP2區(qū)...
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:3921665
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圖1-1PRRSV基因開放閱讀框結(jié)構(gòu)示意圖
(mRNA1-mRNA7),每個亞基因mRNA轉(zhuǎn)錄子能夠翻譯一個或兩個開放閱讀框(ORF)[32]。病毒RNA(mRNA1)能夠翻譯兩個開放閱讀框:ORF1a和ORF1b。ORF1a編碼pp1a多聚蛋白。ORF1b通過核糖體框的轉(zhuǎn)移,形成pp1ab多聚蛋白[3....
圖1-2豬繁殖與呼吸綜合癥病毒粒子電鏡圖和結(jié)構(gòu)示意圖
圖1-2豬繁殖與呼吸綜合癥病毒粒子電鏡圖和結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1-2ThevirionofPRRSV.(A)electronmicrographofextracelluarPRRSVparticles.Bar.23nm.(Snijderetal.....
圖3-2正常的Marc-145細(xì)胞(10X)
圖3-2正常的Marc-145細(xì)胞(10X)圖3-3JILINTN1株病變細(xì)胞圖(10X)Figure3-2NormalMarc-145cellmonolayer(10X)Figure3-3CytopathiceffectoftheJI....
圖3-3JILINTN1株病變細(xì)胞圖(10X)
圖3-2正常的Marc-145細(xì)胞(10X)圖3-3JILINTN1株病變細(xì)胞圖(10X)Figure3-2NormalMarc-145cellmonolayer(10X)Figure3-3CytopathiceffectoftheJI....
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