皰疹病毒臨床治療藥物以核苷酸類似物為主。該類藥物作用靶點(diǎn)類似,容易導(dǎo)致交叉耐藥性,目前臨床已有耐藥毒株出現(xiàn)。因此,發(fā)現(xiàn)新的靶點(diǎn)藥物是未來(lái)研究皰疹病毒藥物的重點(diǎn)。鴨瘟病毒(Duck Plague Virus, DPV)是一種急性傳染性病毒,該病毒屬皰疹病毒科。目前,沒(méi)有針對(duì)DPV的治療藥物出現(xiàn),生產(chǎn)上以注射疫苗預(yù)防為主。本研究擬從天然藥用產(chǎn)物中篩選出具有抗DPV活性的物質(zhì),并對(duì)該物質(zhì)抗病毒機(jī)制進(jìn)行研究,希望能找到新的作用靶點(diǎn),為鴨瘟的治療提供新的方法,也為抗皰疹類病毒藥物的開(kāi)發(fā)提供新的靶點(diǎn)和思路。本研究分為以下幾個(gè)部分：1體外抗DPV活性物質(zhì)篩選選取多種天然藥用產(chǎn)物,運(yùn)用細(xì)胞病變法和噻唑藍(lán)比色法相結(jié)合的方法,進(jìn)行體外抗DPV研究。結(jié)果如下：①傳統(tǒng)中藥粗提物中,虎杖和茜草的醇提物具有一定的抗DPV活性：虎杖醇提物對(duì)DPV最高抑制率為76.5%；茜草醇提物對(duì)DPV最高抑制率為48.91%。②印楝種仁醇提物石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和水層分對(duì)DPV的最高抑制率分別為13.23%、29.24%和11.72%。③油樟揮發(fā)油及其主要活性成分中,松油烯-4-醇、α[-松油烯、γ-松油烯和1,8-桉葉...

【文章頁(yè)數(shù)】：164 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖６－１?ＤＰＶ－ＣＨｖ?ＵＬ３０基因ＰＣＲ產(chǎn)物鑒定圖??１：?ＤＰＶ－?ＣＨｖ?ＵＬ３０ＰＣ民產(chǎn)物；Ｍ：ＤＬ１０００?Ｍａｒｋｅｒ??

（１〇１０￣１〇２）作為標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性模板，進(jìn)行擴(kuò)增。系統(tǒng)自動(dòng)分析軟件顯示Ｃｔ值與標(biāo)準(zhǔn)??陽(yáng)性模板濃度的對(duì)數(shù)之間存在良好的線性關(guān)系（民２＝０．９９７），ＰＣＲ擴(kuò)增效率為??９９．７％，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖６－２所示。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：Ｃ戶－３．３２８ｘ］ｇ?［ｖｉｍｓ??ｃｏｐｉｅｓ／５．２５］＋....

圖６－４白黎蘆醇對(duì)ＤＰＶ在ＤＥＦｓ中的生長(zhǎng)曲錢的影晌ｉ??Ｆｉｇ．?６－４?Ｔｈｅ?Ｓｎｆｌｅｎｃｅ?ｏｆ?ｒｅｓｖｅｎｉｔｒｏｌ?ｏｎ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅｓ?ｏｆ?ＤＦＶ?扣?ＤＥＦｓ．??５７??

?４０??Ｃｙｃｌｅｓ??圖６－３?ＦＱ－ＰＣＲ檢測(cè)白藝蘆醇作用下不同時(shí)間點(diǎn)ＤＥＦｓ中ＤＰＶ基因組樣品的擴(kuò)增曲線??Ｆｉｇ．?６－３?ＡｍｐＨ巧ｃａｔｉｏｎ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＤＰＶ?ｇｅｎｅ?ｓａｍｐｌｅｓ?ｅｘｔｒａｃｔｅｄ?ｆｒｏｍ?ＤＥＦｓ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅ打ｔ?ｐｏ....

圖７－１不同給藥時(shí)間作用后ＤＥＦｓ中生長(zhǎng)的ＤＰＶ滿度的影響??不同的大寫(xiě)字母表示用藥組與病毒感染組的顯著性差異（Ｐ＜０．０１）；不同的小寫(xiě)字母表示各??用藥組之間的顯著性差異（ｐＯ．Ｏｌ）

ＴＣＩＤｓｏ的負(fù)對(duì)數(shù)明顯增高，為６．２５±０．１７。??根據(jù)表７－３所得數(shù)據(jù)，做圖并通過(guò)ＳＰＳＳ軟件對(duì)各組差異性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，??結(jié)果如圖７－１所示。分析表明，各用藥組與病毒感染組結(jié)果差異顯著（ｐＯ．Ｏｌ），??說(shuō)明在所設(shè)置的各加藥時(shí)間點(diǎn)加入白黎蘆醇溶液能夠明顯地抑制ＤＰＶ在Ｄ....

圖８－１總民ＮＡ電泳圖??Ｆｉｇ－８－ｌ?Ｅｌｅｃ：ｔＴ〇ｐｈＧｒｅｔ：ｏｇｒａｍ?ｏｆＲＮＡｓａｍｐｉｅｓ??

３實(shí)驗(yàn)結(jié)果??３．１ＲＮＡ完整性及純度分析??２％瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)提取的總ＲＮＡ純度，電泳結(jié)果如圖８－１??所示，２８Ｓ、１化和５ＳＨ條電泳條帶清晰可見(jiàn)，其結(jié)果表明，提取總ＲＮＡ完整??性良好；通過(guò)核酸蛋白檢測(cè)儀檢測(cè)ＲＮＡ樣品０說(shuō)６０／ＯＤ２８０，其值在１．８０－１．....

本文編號(hào)：3914624