胎盤作為一種暫時(shí)性的營養(yǎng)器官,負(fù)責(zé)了胚胎植入后發(fā)育過程中所需一切營養(yǎng)物質(zhì)的供給。因此,胎盤功能若出現(xiàn)異常將嚴(yán)重影響胚胎發(fā)育進(jìn)程甚至造成妊娠失敗。滋養(yǎng)層干細(xì)胞(trophoblast stem cell,TSC)作為胎盤滋養(yǎng)層的前體細(xì)胞,具有在體外分化形成所有胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞的能力。因此,滋養(yǎng)層干細(xì)胞是研究滋養(yǎng)外胚層分化、滋養(yǎng)層細(xì)胞譜系確立以及胎盤形成的有力細(xì)胞模型,而在體外建立性質(zhì)穩(wěn)定且擁有較強(qiáng)自我更新能力的滋養(yǎng)層干細(xì)胞系將是開啟胎盤研究的基礎(chǔ)和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。2i培養(yǎng)體系因包含PD0325901和CHIR99021兩種抑制劑分子而得名,前者是MEK/ERK信號通路抑制劑,而后者為GSK-3β抑制劑。該體系最初被報(bào)道用于小鼠和大鼠胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cell,ESC)的體外培養(yǎng),利用2i培養(yǎng)體系結(jié)合持續(xù)分泌Wnt3a蛋白的L細(xì)胞與小鼠胎兒成纖維細(xì)胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)作為混合飼養(yǎng)層我們成功建立牛TSC細(xì)胞系(BTS-1),為了深入探究Wnt3a及其對應(yīng)WNT信號通路在牛TSC體外建系中的作用,我們進(jìn)行了以下研究:1.不同培養(yǎng)體系...

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1小鼠胚胎發(fā)育及TSC微環(huán)境示意圖

16圖1小鼠胚胎發(fā)育及TSC微環(huán)境示意圖該圖基于文獻(xiàn)[25]圖4繪制。Fig.1MouseembryodevelopmentandnichesofTSCs

圖2小鼠TSC類型及其集落的不同形態(tài)

型集落；（B）Ⅱ型集落；（C）Ⅲ型集落，箭頭所示區(qū)域?yàn)榧渲兴缮⒌亩询B）Ⅳ型集落，黑色箭頭所示區(qū)域?yàn)槎询B狀細(xì)胞團(tuán)簇，白色箭頭所示為小鼠；（E）尺寸較小的小鼠TSC，箭頭所示為細(xì)胞表面的胞質(zhì)突起結(jié)構(gòu)；（F）TSC，白色箭頭所示為細(xì)胞核，黑色箭頭所示為核仁。（A-D）中虛線框內(nèi)....

圖1.1體外受精牛囊胚

40圖1.1體外受精牛囊胚體外受精后第7-8d的擴(kuò)張囊胚形態(tài)，ICM清晰可見。標(biāo)尺，200μmFig.1.1Invitrofertilizationblastocysts

圖1.2不同培養(yǎng)體系下囊胚來源細(xì)胞集落形態(tài)

44圖1.2不同培養(yǎng)體系下囊胚來源細(xì)胞集落形態(tài)Fig.1.2Thecolonymorphologyofcellsderivedfromblastocystsindifferentculturesystems

本文編號：3910704