目的：通過建立感染PRRSV斷奶仔豬疾病模型,檢測(cè)PRRSV對(duì)仔豬骨髓內(nèi)CD8α基因表達(dá)的影響,初步探討該分子參與仔豬抗PRRSV免疫反應(yīng)機(jī)制。 方法：通過觀察臨床癥狀、病理剖檢變化、HE染色肺部病理切片以及PCR檢測(cè)PRRSV N基因等技術(shù)手段評(píng)價(jià)建立的模型；通過qPCR和Western blot、司接免疫熒光染色檢測(cè)感染PRRSV后仔豬骨髓內(nèi)CD8a表達(dá)量的變化,探究CD8a參與仔豬抗PRRSV的分子免疫機(jī)制。 結(jié)果：成功建立了PRRSV感染斷奶仔豬疾病模型,且在本模型中,感染PRRSV斷奶仔豬骨髓內(nèi)CD8a基因在mRNA水平上顯著上調(diào),其表達(dá)量為正常對(duì)照組的3倍,蛋白水平上CD8a也顯著上調(diào)(p<0.05),同時(shí)表達(dá)CD8a的細(xì)胞也顯著增多。 結(jié)論：感染PRRSV斷奶仔豬骨髓內(nèi)CD8a基因在在轉(zhuǎn)錄水平上的顯著上調(diào)及表達(dá)CD8a的細(xì)胞顯著增多,提示豬感染PRRSV后,骨髓系統(tǒng)內(nèi)CD8a發(fā)揮了免疫功能。

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖1TCR-抗原肽-MHCI三分子復(fù)合物Fig.1ThethreemolecularcomplexofTCR,antigen,peptideandMHC-I

圖1TCR-抗原肽-MHCI三分子復(fù)合物Fig.1ThethreemolecularcomplexofTCR,antigen,peptideandMHC-I3.3.2 CD8分子的免疫調(diào)節(jié)功能2001年Leishman在研究小鼠腸上皮下T淋巴細(xì)胞中CD8....

圖5:骨髓N基因電泳圖（M:500bpMarker；1-4Negativecontrol：5-8：PRRSV組）

圖5:骨髓N基因電泳圖（M:500bpMarker；1-4Negativecontrol：5-8：PRRSV組）Fig.5AgarosegelelectrophoresisofPRRSVNgenePGRproductionfrombone....

圖6豬肺的剖檢病變（左：PRRSV組；右：空白對(duì)照組）

病毒組豬剖檢病變有心肌出血；肝臟腫脹；有些豬腎有出血點(diǎn)；脾臟腫大、有游血現(xiàn)象；肺臟（圖6)腫脹、變硬、呈橡皮狀、肺臟間質(zhì)增寬、肺部呈現(xiàn)斑駁狀；全身淋巴結(jié)腫大，游血。這與仔豬豬感染PRRSV后病理剖檢變化結(jié)果相符。j‘‘‘‘，tf?‘:.??^■魅“圖6豬肺的剖檢病變（左....

圖7:HE染色的肺部切片(40X，左：空白對(duì)照組；右：PRRSV組）

肺部病理切片通過HE染色、鏡檢發(fā)現(xiàn)，PRRSV組肺組織與正常肺組織間對(duì)比，其間質(zhì)增寬、肺泡被破壞或代償性擴(kuò)張（圖7)。纖義圖7:HE染色的肺部切片(40X，左：空白對(duì)照組；右：PRRSV組）Fig.7HEstainingoflungsection(40X,Lef....

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