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綿羊肺炎支原體LY-1株分離鑒定及HSP70 P30基因克隆和序列分析

發(fā)布時間:2024-02-18 08:13
  羊傳染性胸膜肺炎是由支原體引起的羊的一種高度接觸性傳染病,綿羊肺炎支原體(Mycoplasma ovipneumoniae)是其重要病原之一。本研究從發(fā)病羊的肺臟病料中成功分離出1株綿羊肺炎支原體,并對其生物學(xué)特性和免疫原性基因等進行了系統(tǒng)研究,得到了以下研究結(jié)果:1.2016年11月,河南省盧氏縣某規(guī)模化湖羊場發(fā)生疑似綿羊傳染性胸膜肺炎的病例。羔羊和成年羊均可發(fā)生,但羔羊癥狀表現(xiàn)較重。羔羊死亡率約30%,成年羊未見死亡。病羊體溫升高、精神沉郁、食欲減退、咳嗽、呼吸困難和突然死亡。剖檢發(fā)現(xiàn)其以胸、胸膜和肺臟的漿液性和纖維素性炎癥為主要病變特征,具體表現(xiàn)為胸腔和心包有淡黃色積液,胸膜變厚而粗糙,上有黃白色纖維素性沉積,部分羊只發(fā)生胸膜與肋膜、心包發(fā)生粘連;肺表面有出血點,肺小葉間組織變寬,肺臟色澤變暗等典型病變。通過臨床癥狀和病理剖檢,初步判定該病為綿羊傳染性胸膜肺炎。2.從發(fā)病羊的肺臟病料中分離鑒定出1株疑似支原體,命名為LY-1株。該菌培養(yǎng)困難,但在PPLO固體培養(yǎng)基中,經(jīng)37℃靜置培養(yǎng)57日,可長成圓形、透明、露滴狀的針尖大小的菌落;培養(yǎng)141

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1眼觀病理變化

圖2-1眼觀病理變化

急喘、呼吸困難、四肢伸直、倒地不起,發(fā)出呻吟哀叫,直至死亡(圖2-1A)。剖檢死亡羊只,主要以胸、肺臟、肝出現(xiàn)嚴重的病理變化。胸腔有滲出積液(圖2-1B),肺臟表面有滲出液,肺切面呈暗紅色,有淤血,心包有黃白色纖維素附著(圖2-1C和D),肝臟呈暗紅色,上有血班(圖2-1E),....


圖2-2綿羊肺炎支原體組織培養(yǎng)液(A)和純化后的培養(yǎng)液(B)

圖2-2綿羊肺炎支原體組織培養(yǎng)液(A)和純化后的培養(yǎng)液(B)

將培養(yǎng)的菌經(jīng)革蘭氏染色鏡檢(油鏡1000×)可看出菌體被染成紅色,說明為革蘭氏陰性菌,菌落沒有固定的形狀,桿狀、球狀均有,這是支原體多型性的特征(圖2-2A),同時進行瑞氏染液染色鏡檢(油鏡1000×)(圖2-2B),可看出支原體圓形,半透明狀的典型形態(tài),證明此分離菌株為支原體菌....


圖2-3綿羊肺炎支原體革蘭氏染色(A)和瑞氏染色(B)

圖2-3綿羊肺炎支原體革蘭氏染色(A)和瑞氏染色(B)

圖2-2綿羊肺炎支原體組織培養(yǎng)液(A)和純化后的培養(yǎng)液(B)Fig.2-2Mycoplasmaovipneumoniaetissueculturemedium(A)andpurifiedcultureme2.3.3支原體形態(tài)觀察將培養(yǎng)的菌經(jīng)革蘭氏染色鏡....


圖2-4支原體檢測結(jié)果

圖2-4支原體檢測結(jié)果

此次藥敏結(jié)果可為河南地區(qū)綿羊肺炎支原體病的治療提供參考。2.3.6支原體試劑盒檢測用商品化支原體鑒定試劑盒進行套式PCR鑒定結(jié)果如下(圖2-4),參考說明書中第二輪PCR結(jié)果,陽性對照應(yīng)為590bp,待檢測樣品應(yīng)為179bp的片段大小,此分離株P(guān)CR結(jié)果在100bp至25....



本文編號:3902174

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