發(fā)布時(shí)間：2024-02-14 02:35

　　馬立克�。∕arek’s Disease，MD）是由細(xì)胞結(jié)合性皰疹病毒引起的一種傳染性腫瘤病，隨著馬立克病病毒毒力的不斷增強(qiáng)，其對(duì)養(yǎng)禽甘造成了一定的威脅。本研究擬通過(guò)設(shè)計(jì)一對(duì)敏感性和特異性都較好的檢測(cè)引物，從而優(yōu)化馬立克病的PCR檢測(cè)方法，為今后馬立克病的防控提供技術(shù)支撐。2012年，山東省某養(yǎng)雞場(chǎng)暴發(fā)了嚴(yán)重的馬立克病，本實(shí)驗(yàn)室從該雞場(chǎng)分離到一株馬立克病病毒，命名為SD2012-1，本研究對(duì)該株病毒進(jìn)行序列測(cè)定和分析及毒力試驗(yàn)，明確了此毒株的毒力及序列信息，為掌握我國(guó)馬立克病病毒株的進(jìn)化規(guī)律提供線(xiàn)索，為今后馬立克病的防控提供依據(jù)。 本研究根據(jù)馬立克病病毒的Meq基因序列設(shè)計(jì)特異性檢測(cè)引物，與已報(bào)道的4對(duì)檢測(cè)引物進(jìn)行特異性和敏感性的比較研究，結(jié)果表明，5對(duì)PCR引物均具有較好的特異性，但自行設(shè)計(jì)的Meq5引物在DNA濃度為3.81×10-3μg/mL時(shí)仍能夠擴(kuò)增出目的條帶，敏感性明顯優(yōu)于其他4對(duì)引物。應(yīng)用該引物對(duì)組織樣品進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，羽髓、心臟、肝臟、脾、腎臟、腺胃及十二指腸中均能檢測(cè)到馬立克病病毒。 從山東省某發(fā)病雞場(chǎng)采集的樣品中分離到的MDV SD2012-1毒株，經(jīng)PCR方法...

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-15對(duì)引物的特異性檢測(cè)結(jié)果

果異性試驗(yàn)結(jié)果5對(duì)不同檢測(cè)引物Meq1、Meq2、Meq3、Meq4及Meq5，分別用其最馬立克病病毒（MDV）、白血病病毒(ALV)、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病)DNA樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增，用1%的瓊脂糖凝膠電泳。結(jié)果顯示，M增MDV時(shí)能夠擴(kuò)增出一條甘小約為1403bp的....

圖2-25對(duì)Meq基因引物敏感性檢測(cè)結(jié)果

敏感性試驗(yàn)結(jié)果將原來(lái)的DNA（濃度38.1μg/mL）進(jìn)行10倍、100倍、1000倍及10釋?zhuān)♂尯笥?對(duì)不同的針對(duì)Meq基因的引物分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增。結(jié)，Meq1引物在DNA稀釋10倍、100倍、1000倍時(shí)能夠擴(kuò)增出甘小約3b....

圖2-3不同組織中MDV的檢測(cè)

圖2-3不同組織中MDV的檢測(cè)2000DNAMaker1.羽髓2.心臟3.肝臟4.脾5.腎臟6.腺胃7.十Fig.2-3MDVdetectionindifferenttissue000DNAMaker1.Featherpulp2.....

圖3-1PCR鑒定MDV、ALV及REVA:PCR擴(kuò)增Meq基因;B:PCR擴(kuò)增vIL-8基因;C:PCR檢測(cè)ALV;D:PCR檢測(cè)REVM:DL2000DNAMarker;+:REV（C）或ALV（D）陽(yáng)性對(duì)照;1:血液樣品;2:羽髓;3:

圖3-1PCR鑒定MDV、ALV及REVA:PCR擴(kuò)增Meq基因;B:PCR擴(kuò)增vIL-8基因;C:PCR檢測(cè)ALV;D:PCR檢測(cè)REVM:DL2000DNAMarker;+:REV（C）或ALV（D）陽(yáng)性對(duì)照;1:血液樣品;....

本文編號(hào)：3897604