馬立克病（Marek’s Disease，MD）是由細胞結合性皰疹病毒引起的一種傳染性腫瘤病，隨著馬立克病病毒毒力的不斷增強，其對養(yǎng)禽甘造成了一定的威脅。本研究擬通過設計一對敏感性和特異性都較好的檢測引物，從而優(yōu)化馬立克病的PCR檢測方法，為今后馬立克病的防控提供技術支撐。2012年，山東省某養(yǎng)雞場暴發(fā)了嚴重的馬立克病，本實驗室從該雞場分離到一株馬立克病病毒，命名為SD2012-1，本研究對該株病毒進行序列測定和分析及毒力試驗，明確了此毒株的毒力及序列信息，為掌握我國馬立克病病毒株的進化規(guī)律提供線索，為今后馬立克病的防控提供依據(jù)。 本研究根據(jù)馬立克病病毒的Meq基因序列設計特異性檢測引物，與已報道的4對檢測引物進行特異性和敏感性的比較研究，結果表明，5對PCR引物均具有較好的特異性，但自行設計的Meq5引物在DNA濃度為3.81×10-3μg/mL時仍能夠擴增出目的條帶，敏感性明顯優(yōu)于其他4對引物。應用該引物對組織樣品進行檢測，結果表明，羽髓、心臟、肝臟、脾、腎臟、腺胃及十二指腸中均能檢測到馬立克病病毒。 從山東省某發(fā)病雞場采集的樣品中分離到的MDV SD2012-1毒株，經(jīng)PCR方法...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-15對引物的特異性檢測結果

果異性試驗結果5對不同檢測引物Meq1、Meq2、Meq3、Meq4及Meq5，分別用其最馬立克病病毒（MDV）、白血病病毒(ALV)、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病)DNA樣品進行PCR擴增，用1%的瓊脂糖凝膠電泳。結果顯示，M增MDV時能夠擴增出一條甘小約為1403bp的....

圖2-25對Meq基因引物敏感性檢測結果

敏感性試驗結果將原來的DNA（濃度38.1μg/mL）進行10倍、100倍、1000倍及10釋，稀釋后用5對不同的針對Meq基因的引物分別進行PCR擴增。結，Meq1引物在DNA稀釋10倍、100倍、1000倍時能夠擴增出甘小約3b....

圖2-3不同組織中MDV的檢測

圖2-3不同組織中MDV的檢測2000DNAMaker1.羽髓2.心臟3.肝臟4.脾5.腎臟6.腺胃7.十Fig.2-3MDVdetectionindifferenttissue000DNAMaker1.Featherpulp2.....

圖3-1PCR鑒定MDV、ALV及REVA:PCR擴增Meq基因;B:PCR擴增vIL-8基因;C:PCR檢測ALV;D:PCR檢測REVM:DL2000DNAMarker;+:REV（C）或ALV（D）陽性對照;1:血液樣品;2:羽髓;3:

圖3-1PCR鑒定MDV、ALV及REVA:PCR擴增Meq基因;B:PCR擴增vIL-8基因;C:PCR檢測ALV;D:PCR檢測REVM:DL2000DNAMarker;+:REV（C）或ALV（D）陽性對照;1:血液樣品;....

本文編號：3897604